半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

PCR DIG探针合成试剂盒包含碱不稳定性洋地黄毒苷 (DIG)-11脱氧尿苷三磷酸(dUTP)制剂。该试剂盒可方便有效地制备聚合酶链式反应(PCR)所需的高灵敏度DIG标记DNA探针。这一探针可通过PCR方法利用DIG-11dUTP(碱不稳定性)标记。DIG-dUTP:dTTP的比例为1:2。
PCR DIG探针合成试剂盒包含增强高保真DNA聚合酶混合物。这种强大的酶混合物具有校对活性，以10 pg质粒DNA和10 ng基因组DNA为模板，可聚合40 bp至5 kb长的探针。DIG标记探针可稳定储存一年以上。
我们致力于为您提供更环保的替代半岛bd体育手机客户端 ，以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该半岛bd体育手机客户端 为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案，可替代核酸放射性标记和检测。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性，因此，使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。

应用

利用PCR DIG探针合成试剂盒制备的洋地黄毒苷(DIG)标记DNA探针适于检测Southern和Northern杂交中的低(单)拷贝基因mRNA。DIG标记DNA探针也已用于原位杂交过程中的DNA标记。
可根据探针长度调节提供的dUTP-核苷酸混合物浓度。可在琼脂糖凝胶上快速确定标记效果。
可按照包装说明书中的方案，多次抗体剥离和重新检测。
一次PCR标记反应 (50 μl)制备的探针，通常足够用于20 ml杂交溶液。本试剂盒可进行约25次反应(50 μl)。

包装

1个试剂盒包含6种组分。

质量

每个批次的PCR DIG探针合成试剂盒都在PCR中经过功能呢检测。扩增半岛bd体育手机客户端 在基因组Southern blot中进行了检测。
在如本包装内插页所描述的PCR条件下，对照反应可生成442bp的扩增产物。由于在PCR过程中DIG-dUTP的多次插入，PCR产物的分子量将会相对于未标记PCR产物略有提高。在将PCR产物杂交至10μg人类基因组DNA后可通过后续的化学发光检测检测到特异性的片段模式。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
样品材料
任何适合作为PCR模板的DNA都可被标记。可使用：

• 质粒DNA, 10至100pg (最佳量 10pg)
• 基因组DNA, 1至50ng (最佳量, 10ng)

PCR中模板浓度是生成特异性探针的最为重要因素。对于绝大多数模板，请勿使用超过上述的给定量。过多的模板将会导致初级延伸产物的共扩增(那些复制超过了结合位点的)。这些初级延伸半岛bd体育手机客户端 可能会含有重复序列或来自二级结合位点(如果从基因组DNA制备)或载体序列(如果从质粒DNA制备)的不相关产物。在后续的杂交检测中，探针-靶标的杂合物将会因为探针会与载体或基因组DNA序列交叉杂交而形成拖尾。
为了获得更好的结果，可使用克隆的插入片段作为模板。基因组DNA可能会更难以使用。
模板的纯化对于PCR标记并没有其他类型标记那么重要。
一次反应可生成用于分析650cm ²印迹膜的足够标记探针。

半岛bd体育手机客户端 性质

用途	sufficient for 25 reaction (50 μL final reaction volume)
质量水平	100
manufacturer/tradename	Roche
环保替代半岛bd体育手机客户端 特性	Designing Safer Chemicals Learn more about the Principles of Green Chemistry.
环保替代半岛bd体育手机客户端 分类	Aligned
运输	dry ice
储存温度	?20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号	组份
	Enzyme Mix, Expand High Fidelity 3.5 U/μl
	PCR DIG Probe Synthesis Mix, containing dATP, dCTP, dGTP (2 mM each) 10x concentrated
	PCR Buffer with MgCl210x concentrated
	dNTP Stock Solution, containing dATP, dCTP, dGTP, dTTP (2 mM each), pH 7.0 10x concentrated
	Control Template, plasmid DNA in Tris/EDTA buffer, pH 8.0. The 5-kb plasmid contains the cDNA for the human tissue-type plasminogen activator (tPA) 20 pg/μl
	Control PCR Primer Mix, containing 50 pmol of each primer, control PCR primer 1 and 2 2 mM each

安全信息

危险声明	H412
预防措施声明	P273 - P501
危险分类	Aquatic Chronic 3
储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 2
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash