半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

Duolink^?原位检测试剂Green包含所有必需的Duolink原位试剂，以用于进行结合PLA^?探头的扩增和检测。检测探针含有一种荧光团(lex = 495 nm，lem = 527 nm)，其可以使用与Cy^?2或FITC相同的滤光片进行显示。使用Duolink原位试剂进行实验可以在固定细胞和组织样品中，在单分子水平上对蛋白质相互作用、翻译后修饰和蛋白质表达水平进行内源性检测。

特异性

绿色荧光检测试剂通常与FITC滤光片一起使用。

应用

Duolink^?原位检测试剂已被用于邻位连接测定：

• 检测来自冷冻大鼠脑切片
• 人胚肾 293 细胞 (HEK)
• 垂体组织中加压素和促性腺激素释放激素 (GnRH)的结合

Duolink ^?邻位连接检测(PLA ^?)可在单分子水平上对固定细胞和组织样品的蛋白质相互作用、翻译后修饰和蛋白质表达水平进行内源性检测。

特点和优势

• 不需要过表达或基因操纵
• 特异性高(假阳性较少)
• 因滚环扩增而具有单分子灵敏度
• 可进行相对定量
• 无需特殊设备
• 比FRET更快、更简单
• 准确性高于免疫共沉淀
• 结果可直接发表

组分

• 5x连接 - 包含与PLA探针杂交的寡核苷酸和除连接酶外的连接所需的所有组分
• 1x连接酶(1单位/μL)
• 1x聚合酶(10单位/μL)
• 5xAmplification Green - 包含除聚合酶外的滚环扩增(RCA)所需的所有组分。它还包含用荧光团标记的寡核苷酸探针，其能与RCA产物进行杂交。

有关更多信息，请参见数据表。

不包括在检测试剂盒中：

一抗、PLA探针、洗涤缓冲液、封固剂

制备说明

要进行完整的Duolink^?PLA原位实验 ，您需要两种一抗(PLA、IHC、ICC或IF验证)识别两个靶表位。其他必需试剂包括来自不同物种的一对PLA探针(一个PLUS和一个MINUS)、检测试剂、洗涤缓冲液和封固剂。请注意，一抗必须来源于与Duolink^?PLA探针相同的物种。使用标准免疫荧光检测设备进行分析。

储存及稳定性

将其组分储存在-20℃条件下。酶应始终保持冷冻(-20℃)，从冷冻室中取出时应将其置于冷冻块上。

其他说明

遵循Duolink^?原位荧光方案使用本半岛bd体育手机客户端 。还提供了一组简介

请访问我们的Duolink^?PLA资源中心，了解有关如何运行Duolink^?实验、应用程序、故障排除等的信息。
请让我们助您完成工作，了解有关我们的定制服务计划的更多信息，加速您的Duolink^?项目

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法律信息

Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of sigma-aldrich Co. LLC
PLA is a registered trademark of sigma-aldrich Co. LLC

基本信息

NACRES

NA.32

半岛bd体育手机客户端 性质

质量水平	200
半岛bd体育手机客户端 线	Duolink?
technique(s)	proximity ligation assay: suitable
荧光	λex495 nm; λem527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)
适用性	suitable for fluorescence
运输	dry ice
储存温度	?20℃

安全信息

储存分类代码	10 - Combustible liquids
WGK	WGK 2