半岛bd体育手机客户端 说明
一般描述
转录因子NFkappaB(Nuclear Factor kappa B)可参与许多重要细胞和生理过程的表达和调控,例如生长、发育、凋亡、免疫和炎症反应以及各种病毒启动子(包括人类免疫缺陷病毒长末端重复序列)的激活。NFkappaB代表一组与原癌基因c-Rel有关的结构相关且在进化上保守的蛋白质,在哺乳动物中有5个成员,包括Rel(cRel)、RelA(p65)、RelB、NFkappaB1(p50及其前体p105)和NFkappaB2 (p52及其前体p100)。NFkappaB/Rel蛋白以同二聚体或异二聚体的形式存在,以形成转录感受态或阻抑复合物。尽管大多数NFkappaB二聚体是转录激活因子,但p50/50和p52/52同二聚体可以抑制其靶基因的转录。NFkappaB的p50/p65异二聚体在细胞中含量最高。
特异性
可识别与NFkB异二聚体的p65亚基的核定位信号(NLS)重叠的表位。因此,它可选择性地与NFkB的活化形式进行结合(Zabel等,1993)。该抗体也可用于凝胶迁移(EMSA)。核因子kB(NFkB)是一种序列特异性DNA结合蛋白(Sen & Baltimore,1986)。它是一种多效转录因子,可参与多种细胞和病毒基因的表达(Lenardo & Baltimore, 1989)。NFkB由两个亚基组成,根据其分子量分别命名为p50和p65(Kawakami等, 1988)。亚基通过所谓的抑制链IkB进行稳定(Baeuerle & Baltimore, 1988)。在静止细胞中,NFkB以无活性形式存在于细胞质中,可以通过使用细胞因子或蛋白激酶激活剂处理细胞来进行体内激活。在体外,可以通过使用脱氧胆酸钠、福尔马丁或电泳分级分离法处理来产生活性形式的NFkB。NFkB的活性形式是一种异四聚体蛋白,由两个p50和两个p65亚基组成(Lenardo等,1987)。激活后,NFkB可从胞质溶胶转移到细胞核,与特定的DNA序列结合并启动转录。
免疫原
表位:p65亚基,活性亚基
对应BSA偶联人p65的多肽。
应用
研究子类别
转录因子
使用已在EMSA、FC、ICC、IF、IHC、IHC(P)、WB中得到验证的抗NFκB抗体,p65亚基,活性亚基,克隆12H11(小鼠单克隆抗体)对NFκB(也称为RelA)进行检测。
免疫荧光:
浓度为1-10 μg/mL的先前批次已被用于免疫荧光中。
免疫组织化学(石蜡切片):
浓度为5-10 μg/mL(APAAP)的先前批次已被用于免疫组化中。
免疫组织化学(冷冻切片):
浓度为5-10 μg/mL(APAAP)的先前批次已被用于免疫组化中。
免疫组织化学:
克隆12H11在新鲜的冷冻或丙酮固定的人体组织中效果最好,但是当组织是人源时,某些组别会在传统的福尔马林固定的组织中具有反应性。建议在丙酮或福尔马林固定组织中采用ABC或增强型检测系统以实现最佳可视化。该抗体与人体组织的反应最佳。大鼠组织也会发生反应,但亲和力较低,并且该抗体不会与小鼠反应,其他物种尚未进行检查。微波柠檬酸缓冲液或胰蛋白酶消化抗原回收均已成功地与12H11一起用于福尔马林固定组织上。
免疫印迹: 5-10 ?g/mL(ECL)
电泳迁移率超迁移测定:
浓度为0.5-1 μg/mL的先前批次已被用于超迁移测定中。
流式细胞术:
先前批次的该抗体已被用于流式细胞术中。仅用于固定细胞(丙酮固定细胞)。
最佳工作稀释液必须由最终用户进行确定。
研究类别
表观遗传学&核功能
质量
通过免疫印迹对PC12裂解物进行常规评估。
免疫印迹:
该批次的1:500稀释液对10 μg PC12裂解物中的NF KAPPA B、P65进行检测。
目标描述
65kda
外形
形式:纯化
纯化的蛋白 A
纯化的小鼠单克隆IgG3溶液,溶于含0.02 M磷酸盐缓冲液(pH 7.6)、0.25 M NaCl、和0.1%叠氮化钠的缓冲液中。
储存及稳定性
自收到之日起在2-8?C可稳定保存6个月。
避免反复冻融。为了最大程度地回收半岛bd体育手机客户端 ,在融化后和取下盖子之前,将原始样品瓶进行离心。
分析说明
对照
TNFα处理的HeLa细胞,PMA和钙离子载体处理的Jurkat细胞。
其他说明
浓度:请参考批次特异性浓缩物的分析证书。
法律信息
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免责声明
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基本信息
eCl@ss | 32160702 |
NACRES | NA.41 |
半岛bd体育手机客户端 性质
质量水平 | 100 |
生物来源 | mouse |
抗体形式 | purified immunoglobulin |
antibody product type | primary antibodies |
克隆 | 12H11, monoclonal |
species reactivity | rabbit, rat, human |
species reactivity (predicted by homology) | mouse |
包装 | antibody small pack of 25 μg |
manufacturer/tradename | Chemicon? |
technique(s) | electrophoretic mobility shift assay: suitable flow cytometry: suitable immunocytochemistry: suitable immunofluorescence: suitable immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable western blot: suitable |
同位素/亚型 | IgG3 |
NCBI登记号 | NP_068810.3 |
UniProt登记号 | Q04206 |
运输 | ambient |
储存温度 | 2-8℃ |
Sigma-Aldrich