半岛bd体育手机客户端 说明
一般描述
正磷酸单酯磷酸水解酶(碱性最佳)
碱性磷酸酶催化从磷酸化的各种化合物中除去磷酸基团。它水解 DNA 和 RNA 中的 5′-单磷酸酯基团。它还可以从 RNA 中水解 5′-二磷酸和 5′-三磷酸基团。
特异性
热失活:AP 活性通过在 65℃ 温育被不可逆转地破坏。
去饱和取决于蛋白质浓度 - 使用低于 10 U/ml(0.1 mol/l 甘氨酸缓冲液,pH 10.5,1 mmol/l MgCl2和 0.1 mmol ZnCl2) ,AP 在 65℃ 孵育 10 分钟后失活。
应用
从寡核苷酸和蛋白质核苷酸交换和释放中选择性切割末端磷酸基团。它还用于磷酸化样品,以区分磷酸酯部分(以磷酸化聚糖形式存在)和磷酸化氨基酸残基。
质量
污染物:PDE <0.0004%,ADA 和 A-5-MP 脱氨酶 <0.004%
序列
AP 是相同或几乎相同的亚基的二聚体;每一个都包含 2 个 Zn2+分子,一个紧密结合,且是结构稳定所必需的,另一个是松散结合的,且是催化活性所必需的。活性位点含有反应性丝氨酸。
在一些哺乳动物(例如人)中,至少存在 3 种可区分的同工酶:肠、胎盘,以及在骨/肝/肾中发现的形式。
单位定义
单位转换:1 Roche 单位(在 +25℃ 下测试)对应约 2 至 2.5 Sigma 单位(在 +37℃ 下测试)。
AP 活性不以阿姆斯壮单位表示;国际单位的转换系数尚不清楚。
约 3.8 U(I 级 AP)或 4.0 U(II 级 AP)[+37℃,4-NPP 作为底物,二乙醇胺作为缓冲液,pH 9.8] = 1 U [+25℃,4-NPP 作为底物,甘氨酸作为缓冲液,pH 10.5]。
生化信息。 87(I 级 AP):
1.0 U [+37℃,QC 测定条件] = 0.79 U [+ 30℃,QC 测定条件] = 0.57 U [+25℃,QC 测定条件]
外形
悬浮液,溶剂为 3.2M 硫酸铵溶液,含有 1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,pH 约 7
制备说明
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.1.3.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
半岛bd体育手机客户端 性质
质量水平 | 100 |
生物来源 | bovine (calf) intestine |
形式 | suspension |
specific activity | ~2000 units/mg protein (At 37 ℃ with 4-nitrophenyl phosphate as the substrate, and diethanolamine as the buffer (400 U/mg at 25 ℃ with 4-nitrophenyl phosphate as the substrate, and glycine as the buffer)) |
包装 | pkg of 1,500 U (10108138001) pkg of 7,500 U (10108146001) |
manufacturer/tradename | Roche |
最佳pH | 8.0-10.5 |
吸光度 | 7.6 at 278 nm (10 mg AP/ml) |
运输 | wet ice |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |
Sigma-Aldrich