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Alkaline Phosphatase (AP)

碱性磷酸酶 (AP)

品牌
Roche
货号
API-RO
规格纯度
grade I, from calf intestine
价格
971.56 *本价格含增值税费
促销
服务
  • 原厂保证
  • 包邮
  • 增值税票
数量
- +
半岛bd体育手机客户端 名称:
Alkaline Phosphatase (AP)
碱性磷酸酶 (AP)
半岛bd体育手机客户端 介绍:

半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

正磷酸单酯磷酸水解酶(碱性最佳)
碱性磷酸酶催化从磷酸化的各种化合物中除去磷酸基团。它水解 DNA 和 RNA 中的 5′-单磷酸酯基团。它还可以从 RNA 中水解 5′-二磷酸和 5′-三磷酸基团。

特异性

热失活:AP 活性通过在 65℃ 温育被不可逆转地破坏。
去饱和取决于蛋白质浓度 - 使用低于 10 U/ml(0.1 mol/l 甘氨酸缓冲液,pH 10.5,1 mmol/l MgCl2和 0.1 mmol ZnCl2) ,AP 在 65℃ 孵育 10 分钟后失活。

应用

从寡核苷酸和蛋白质核苷酸交换和释放中选择性切割末端磷酸基团。它还用于磷酸化样品,以区分磷酸酯部分(以磷酸化聚糖形式存在)和磷酸化氨基酸残基。

质量

污染物:PDE <0.0004%,ADA 和 A-5-MP 脱氨酶 <0.004%

序列

AP 是相同或几乎相同的亚基的二聚体;每一个都包含 2 个 Zn2+分子,一个紧密结合,且是结构稳定所必需的,另一个是松散结合的,且是催化活性所必需的。活性位点含有反应性丝氨酸。
在一些哺乳动物(例如人)中,至少存在 3 种可区分的同工酶:肠、胎盘,以及在骨/肝/肾中发现的形式。

单位定义

单位转换:1 Roche 单位(在 +25℃ 下测试)对应约 2 至 2.5 Sigma 单位(在 +37℃ 下测试)。
AP 活性不以阿姆斯壮单位表示;国际单位的转换系数尚不清楚。
约 3.8 U(I 级 AP)或 4.0 U(II 级 AP)[+37℃,4-NPP 作为底物,二乙醇胺作为缓冲液,pH 9.8] = 1 U [+25℃,4-NPP 作为底物,甘氨酸作为缓冲液,pH 10.5]。

生化信息。 87(I 级 AP):
1.0 U [+37℃,QC 测定条件] = 0.79 U [+ 30℃,QC 测定条件] = 0.57 U [+25℃,QC 测定条件]

外形

悬浮液,溶剂为 3.2M 硫酸铵溶液,含有 1 mM MgCl2,0.1 mM ZnCl2,pH 约 7

制备说明

  • 活化剂:二价金属离子(Mg2+、Co2+、Mn2+)
  • 氨基醇(2-氨基-2-甲基-1-丙醇,二乙醇胺)

注意,高浓度的氨基醇也可以作为竞争性抑制剂(例如二乙醇胺中的单乙醇胺)。

储存条件(工作溶液):悬浮液的浓度 = 约 5 mg/ml。
如果再用含有 1 mM MgCl 2,0.1 mM ZnCl 2,pH 约为 7 的 3.2 M 硫酸铵溶液,稀释该悬浮液仅 5 至 10 倍,从一般经验看来,如果将其储存在 4℃,可能稳定几周(不保证!)。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

基本信息

酶学委员会(EC)编号 3.1.3.1 ( BRENDA | IUBMB )

半岛bd体育手机客户端 性质

质量水平 100
生物来源 bovine (calf) intestine
形式 suspension
specific activity ~2000 units/mg protein (At 37 ℃ with 4-nitrophenyl phosphate as the substrate, and diethanolamine as the buffer (400 U/mg at 25 ℃ with 4-nitrophenyl phosphate as the substrate, and glycine as the buffer))
包装 pkg of 1,500 U (10108138001)
pkg of 7,500 U (10108146001)
manufacturer/tradename Roche
最佳pH 8.0-10.5
吸光度 7.6 at 278 nm (10 mg AP/ml)
运输 wet ice
储存温度 2-8℃

安全信息

储存分类代码 12 - Non Combustible Liquids
WGK WGK 1
闪点(F) does not flash
闪点(C) does not flash

Sigma-Aldrich

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