半岛bd体育手机客户端 说明
一般描述
胰蛋白酶是由含223个氨基酸残基的单链多肽组成的,它通过切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽键以去除N-末端六肽而获得。氨基酸序列通过六个二硫键交联。这是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。β-胰蛋白酶可以自溶,在Lys-Ser残基处断裂,产生α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。
应用
本品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。使细胞解离所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物代数。
胰蛋白酶-EDTA溶液1X已用于细胞的解离/胰蛋白酶消化。
生化/生理作用
胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端肽段。如果酸性残基位于切割位点的任意一侧,则该反应的水解速度减慢,并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧,则水解停止。胰蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。将EDTA(乙二胺四乙酸)添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂,用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。去除这些离子会增加酶活性。
丝氨酸蛋白酶抑制剂,包括DFP(二异丙基氟磷酸盐)、TLCK(Na-p-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮)、APMSF(4-脒基苯基甲磺酰氟)、AEBSEF(4-(2-氨基甲基)苯磺酰氟)和抑肽酶等,会抑制胰蛋白酶。
注意
本品应置于-10至-40℃环境冷冻储存。避免反复冻融。
制备说明
本半岛bd体育手机客户端 含有酚红。 由于在干冰上运输,包装中可能累积大量二氧化碳。 这些CO2可能会进入溶液并略微降低pH值,使溶液呈橙色而不是粉红色。 橙色溶液仍然可以使用,或者可以用氢氧化钠调节pH。 使用高浓度胰蛋白酶长时间孵育细胞,会破坏细胞膜并杀死细胞。 溶解胰蛋白酶或稀释浓缩胰蛋白酶溶液时,应使用不含Ca2+或Mg2+的缓冲盐溶液。
基本信息
MDL编号 | MFCD00130286 |
半岛bd体育手机客户端 性质
质量水平 | 400 |
描述 | for research or for further manufacturing use |
无菌性 | sterile-filtered |
形式 | liquid |
组分 | NaHCO3: 350.000 mg/L phenol red: 10.620 mg/L |
运输 | dry ice |
储存温度 | ?20℃ |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich