半岛bd体育手机客户端 说明
一般描述
CAS9,也称为成簇的规律间隔性短回文重复序列(CRISPR)相关蛋白9核酸酶、cas5和csn1,是II型CRISPR -RuvC(RNase H样折叠)cas系统的特征基因。 CAS9包含1388个氨基酸。预测该蛋白质包含一个参与crRNA成熟的RuvC/核糖核酸酶(RNase)H结构域,以及一个参与DNA降解步骤的McrA/HNH 特征结构域。
CRISPR(成簇的规律间隔性短回文重复序列)属于II型CRISPR/CAS9系统。它是化脓性链球菌SF370的适应性免疫系统的组成部分,通过序列依赖性方式切割外源DNA来防止病原体靶基因受到侵害。2 已适应真核细胞表达的II型CRISPR/Cas系统由四种基因组成,包括Cas9(CRISPR相关蛋白)核酸酶,两个非编码CRISPR RNA(crRNA或gRNA),反式激活crRNA(tracrRNA)和一个前体crRNA(pre-crRNA)阵列。pre-crRNA包含核酸酶向导序列(间隔子),由相同的直接重复序列(DR)隔开。
利用单个gRNA在目标基因组位置指导DNA双链断裂(DSB),可以对Cas9核酸内切酶进行工程改造。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后激活内源性DNA修复过程,即非同源末端连接(NHEJ)或同源性定向修复(HDR),进而修复目标DSB。与设计锌指(ZFs)、转录激活因子样效应物(TALE)和归巢大范围核酸酶等其他基因组编辑技术相比,CRISPR/CAS9系统可扩展、价格实惠且易于设计。因此,CRISPR/CAS9 抗体成为检测CRISPR/CAS9阳性转染细胞的实用工具,用于基因组和ChIP(染色质免疫沉淀)相关测定以揭示DSB位点。
免疫原
化脓性链球菌Cas9 N末端区域的重组蛋白
应用
CRISPR/CAS9单克隆抗体可以识别含有CAS9构建体的过表达系统。该抗体成功识别了Cas9突变体,包括切口酶Cas9和死亡Cas9(dCas9)。该抗体可用于多种免疫化学技术,包括免疫印迹、免疫荧光和免疫沉淀。CRISPR/CAS9单克隆抗体与新凶手弗朗西丝菌的FnCas9以及氨基酸球菌属(BV3L6菌株)和毛螺科菌ND2006的Cpf1蛋白不发生交叉反应。
生化/生理作用
CAS9在质粒DNA干扰中具有至关重要的作用。它是对外源DNA产生抗性所需的唯一cas蛋白。 CAS9可刺激RNA向导的基因组编辑和各种生物体中的基因调控,但它可以在任何给定细胞内一次仅促进一种活性。
外形
本品为溶液形式,溶于0.01M磷酸盐缓冲盐水,pH 7.4,含有15 mM叠氮化钠作为防腐剂。
储存及稳定性
如需连续使用,可在2-8℃下保存一个月。对于长期储存,可将工作浓度的分装品冷冻。不建议反复冻融。如果长期储存时出现轻微混浊,使用前通过离心澄清溶液。如果在12小时内未使用,则应丢弃工作稀释样品。
其他说明
本半岛bd体育手机客户端 仅供研发使用,不得用于药物、家庭或其他用途。
为了在不同的技术和制备中获得最佳结果,我们建议通过效价测试确定最佳的工作浓度。
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基本信息
NACRES | NA.41 |
半岛bd体育手机客户端 性质
质量水平 | 200 |
生物来源 | mouse |
抗体形式 | purified from hybridoma cell culture |
antibody product type | primary antibodies |
克隆 | 7A9-3A3, monoclonal |
形式 | buffered aqueous solution |
包装 | antibody small pack of 25 μL |
浓度 | ~1 mg/mL |
technique(s) | immunoblotting: 1-2 μg/mL using whole extracts of human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein immunofluorescence: 1-2 μg/mL using human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein. immunoprecipitation (IP): 5-10 μg using whole extract of human HEK-293T cells over-expressing CAS9 protein |
同位素/亚型 | IgG1 |
运输 | dry ice |
储存温度 | ?20℃ |
安全信息
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
Sigma-Aldrich