半岛bd体育手机客户端 说明
一般描述
来自大肠杆菌的 β-半乳糖苷酶的基因被广泛用作报告基因测定标记。尽管 X-gal 是检测细胞或组织样品中 β-半乳糖苷酶的众所周知的试剂,但由于这些细胞的渗透性差,因此使用这些试剂进行的分析需要固定细胞或组织。另外,迄今为止开发的使用荧光试剂的测定不能清楚地区分表达 β-半乳糖苷酶的细胞或区域。
为了克服这些问题,Urano、Kamiya 和他的同事们已经成功开发出一种理想的染色剂,该染色剂具有细胞渗透性并能保留在细胞内区域。1)
通过酶促反应,β-半乳糖苷酶染色剂立即形成醌甲基化物,当在分子附近包含亲核官能团的蛋白时,该醌甲基化物充当亲电子试剂。探针与蛋白反应形成的结合物成为了荧光化合物。因此,它可以进行单细胞分析,因为它可以自固定到胞内蛋白上。
最大激发波长:530 nm(±10nm)
最大发射波长:550 nm(±10 nm)
参考文献:
1)Y. Urano, M. Kamiya, T. Doura, WO 2015174460, A1, (19, November, 2015).
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应用
1 mmol 染色 DMSO 储备溶液的制备
将 35 μl DMSO 加入一管染色溶液(20 μg)中,然后用移液器将其溶解。
*将原液保存在 -20℃ 下。
1 μmol/l 染色工作液的制备
使用 Hanks′ HEPES 缓冲液稀释染色 DMSO 原液来制备 1 μmol/l 的染色工作液。
*建议使用 Hanks′ HEPES 缓冲液维持细胞状态。
通用实验方案:
染色
1.制备用于检测的细胞。
2.丢弃培养基,并用 Hanks HEPES 缓冲液洗涤细胞 2 次。
3.添加适量的染色工作溶液。
4.37℃ 孵育 15 分钟。
5.在荧光显微镜下或通过流式细胞仪观察细胞。
*染色后,即使不洗涤也可以观察到细胞。但是,您可以根据需要洗涤细胞。
基本信息
经验(实验)分子式 | C31H34FNO8 |
分子量 | 567.60 |
NACRES | NA.32 |
半岛bd体育手机客户端 性质
质量水平 | 100 |
储存温度 | 2-8℃ |
SMILES string | O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(C=C2)=C(CF)C3=C2C4(C(C=CC=C5)=C5CO4)C(C=CC(N(CC)CC)=C6)=C6O3)O[C@H](CO)[C@@H]1O |
安全信息
储存分类代码 | 13 - Non Combustible Solids |
WGK | WGK 3 |
Sigma-Aldrich