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一般描述

钙结合蛋白D-28K是一种高度保守的28 kDa钙结合蛋白，具有广泛的组织分布。
钙结合蛋白D-28K单克隆抗体(小鼠IgG1同种型)来源于小鼠骨髓瘤细胞与脾细胞融合产生的CB-955杂交瘤，这些小鼠是用纯化的牛肾钙结合蛋白D-28K免疫的BALB/c小鼠。使用小鼠单克隆抗体分型试剂(目录号ISO2)，通过双扩散免疫测定法确定同种型。
钙结合蛋白D-28K与钙调蛋白、S-100、小白蛋白、肌钙蛋白C和其他蛋白质同属于低分子量钙结合蛋白家族(CaBPs)。这些CaBP具有同源的一级结构，其含有EF-手型的多肽折叠结构以接受Ca²⁺。钙结合蛋白是一种新颖的神经解剖学标记物。尽管钙结合蛋白D-28K的组织分布广泛，但它表现出细胞类型特异性表达模式。因此，它已被免疫细胞化学定位于许多CNS结构的指定细胞中，作为细胞内钙缓冲剂或作用于钙的膜内转运。它主要存在于中枢和外周神经系统神经元的亚群中，以及参与Ca²⁺ 转运的某些上皮细胞中，如肾的远端肾小管细胞和皮质集合小管，以及肠神经内分泌细胞。与钙结合蛋白D-28K发生特异性反应的单克隆抗体有助于钙结合蛋白在不同组织和细胞群中的定位。

特异性

该抗体不与EF-手型家族的其他成员反应，如钙结合蛋白-D-9K、钙网膜蛋白、肌球蛋白轻链、小白蛋白、S-100a、S-100b、S-100A2(S100L)和S-100A6(钙周期蛋白)。与鸡钙结合蛋白D-28K具有较弱的反应性。

免疫原

牛肾钙结合蛋白-D

应用

小鼠钙结合蛋白D-28K单克隆抗体可用于免疫组织化学(酒精、福尔马林和methacarn固定的石蜡包埋冷冻组织切片)。福尔马林固定石蜡包埋切片的酶促预消化改善了免疫组织化学染色。小鼠抗体适用于间接ELISA，以1:3000的工作稀释度用于MDBK细胞提取物的蛋白质免疫印迹分析以及以1:3000的工作稀释度用于对胰蛋白酶消化的福尔马林固定石蜡包埋大鼠小脑切片进行间接免疫过氧化物酶染色。在研究中以1:500的工作稀释度用于免疫组织化学和免疫细胞化学，以了解CAPS2(参与神经营养蛋白释放的蛋白质)缺陷小鼠的受损小脑发育和功能。它被用于免疫染色，以衡量胰岛类因子Islet-1 (Isl1)-null和对照视网膜的内核层中神经元和神经胶质细胞的发育。它被用于免疫组织化学共定位研究，以确认RGS11复合物的突触后定位。

生化/生理作用

钙结合蛋白D-28K参与钙的膜内转运或在许多CNS结构中作为细胞内钙缓冲液，如中枢和外周神经系统神经元亚群。它也存在于参与Ca²⁺ 转运的某些上皮细胞中，如肾的远端肾小管细胞和皮质集合小管，以及肠神经内分泌细胞。

外形

该试剂为腹水液，含15mM叠氮化钠作为防腐剂。

储存及稳定性

若需连续使用，可在2-8℃下保存最长一个月。若需延长储存时间，可将溶液分装并冷冻。不建议反复冻融或存放在“无霜”冰柜中。如果长期储存时出现轻微浑浊，请在使用前通过离心澄清溶液。若工作稀释样品在12小时内未使用完，则应丢弃。

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