半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

分子量为43kDa的间隙连接蛋白(间隙连接蛋白43，Cx43)是一种在大多数组织中表达的磷酸化蛋白，但在不同细胞类型中的表达模式可能不同(例如，在脑中，它在星形胶质细胞、室管膜和脑膜中表达，但在神经元、少突胶质细胞和松果体细胞中无表达；或者在肝脏中，它在Ito细胞中表达，但在肝细胞中无表达。间隙连接蛋白水平随组织结构的破坏而改变。例如，已发现动脉粥样硬化早期阶段的Cx43表达增加。
兔抗间隙连接蛋白43抗体是以戊二醛作为免疫原并使用与KLH偶联的合成肽开发的。该肽对应于人和大鼠间隙连接蛋白43的细胞质区域的C末端部分(具有N-末端添加赖氨酸的氨基酸残基)。通过免疫特异性纯化获得亲和分离的抗原特异性抗体，其基本去除了所有兔血清蛋白，包括不与间隙连接蛋白43特异性结合的免疫球蛋白。
间隙连接是特化的细胞膜区域，由直接连接相邻细胞质的细胞间通道聚集而成。间隙连接可协调组织中的细胞和器官功能，并参与细胞之间的代谢协作、电耦合、细胞生理活动同步、生长控制和发育调节。间隙连接通道使相邻细胞可以交换离子、核苷酸和小分子。与其他膜通道不同，细胞间通道跨越两个相对的细胞膜，并且需要来自两个参与细胞的半通道(称为连接子)的共同作用。这些通道允许大至1 kDa的分子通过，并且存在于大多数类型的哺乳动物细胞。两个连接子在细胞外空间相互作用，形成完整的细胞间通道。每个连接子由六个相似或相同的蛋白质组成，这些蛋白质被称为间隙连接蛋白。间隙连接蛋白(Cx)是一类高度相关蛋白的多基因家族，分子量范围为26-70kDa。目前已在哺乳动物中鉴定了至少12种不同的间隙连接蛋白基因，其中，许多基因以不同的组织和细胞特异性模式表达。已在哺乳动物中鉴定出两种不同的谱系，一种称为I类或β类，其中包括Cx26、Cx30、Cx31、Cx31.1和Cx32；另一种称为II类或α类，以Cx33、Cx37、Cx40、Cx43和Cx46为代表。
Connexin-43(Cx-43)是一种分子量为43kDa的蛋白质，它是形成间隙连接的间隙连接蛋白家族的成员。它表达于多种细胞类型中，如星形胶质细胞、心肌和平滑肌细胞、内皮细胞、室管膜细胞、成纤维细胞、角质形成细胞，晶状体和角膜上皮细胞等。此外，该蛋白质还存在于软脑膜、白细胞、睾丸间质细胞、巨噬细胞、乳腺肌上皮细胞、骨细胞、卵巢颗粒、胰腺β-细胞、胚胎植入前囊胚、足细胞、甲状腺滤泡细胞和滋养层巨细胞中。

特异性

间隙连接蛋白43抗体可以与间隙连接蛋白43发生特异性反应。通过蛋白质免疫印迹分析发现，抗体在43kDa区域呈单个条带或2-3个条带。间隙连接蛋白43肽可特异性抑制免疫印迹中间隙连接蛋白43条带的染色。已利用人、牛、大鼠、小鼠、仓鼠和鸡间隙连接蛋白43观察了抗体的反应性。

免疫原

合成肽对应于人/大鼠间隙连接蛋白43的细胞质区域的C末端部分(具有N-末端添加赖氨酸的氨基酸)。

应用

间隙连接蛋白43抗体可用于免疫印迹、免疫细胞化学和免疫组织化学分析(冷冻和福尔马林固定石蜡包埋的组织)。与Cx43发生特异性反应的多克隆抗体可用于多种细胞和分子方法中，以研究间隙连接及其性质。
通过对小鼠脑的完全提取物进行免疫印迹分析，确定抗体的最低工作稀释度为1:8,000。
通过对丙酮固定的培养幼仓鼠肾(BHK)细胞进行间接免疫荧光染色，确定测定抗体的最低工作稀释度为1:400。
通过对大鼠心脏进行间接免疫荧光染色，确定抗体的最低工作稀释度为1:2,000。(对大鼠肝脏切片呈阴性)
通过对胰蛋白酶消化的、福尔马林固定石蜡包埋的人或动物组织切片进行间接免疫过氧化物酶染色，确定抗体的最低工作稀释度为1:2,000。

生化/生理作用

间隙连接蛋白43(Cx-43)在神经元迁移中可能发挥重要作用，因为它位于与迁移神经元密切相关的放射状胶质纤维中。它还参与跨膜NAD⁺转运。间隙连接蛋白43是间隙连接的一个元件，有助于细胞间通讯。已知Cx-43在子宫动脉内皮细胞(UAEC)中可诱导[Ca²⁺]_i爆发现象。在人冠状动脉粥样硬化的早期阶段，已观察到Cx-43的表达升高。各种细胞类型的间隙连接蛋白表达水平降低或类型改变与肿瘤进展和转移相关。然而，使用致癌基因neu(c-erb-B2)转染的神经胶质瘤细胞表现出细胞间通讯显著减少，而Cx43整体表达水平没有降低。已发现在大鼠的发育和哺乳期间，存在不同状态的Cx43磷酸化。间隙连接蛋白43突变出现在心脏发育不对称的儿童中，并且在小鼠中敲除该基因后出现致命的心脏畸形。与Cx438-11发生特异性反应的多克隆抗体可用于多种细胞和分子方法中，以研究间隙连接及其性质，并将它们在各种细胞类型和组织中的表达模式与生理功能或病理状况相关联。

外形

溶于0.01M磷酸盐缓冲盐水，pH 7.4，含有1%牛血清白蛋白以及15 mM叠氮化钠。

储存及稳定性

若需连续使用，可在2-8℃下保存最长一个月。若需延长储存时间，可将溶液分装并冷冻。不建议反复冻融。不建议存放在“无霜”冰柜中。如果长期储存时出现轻微浑浊，请在使用前通过离心澄清溶液。

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