半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶的进化解决了广泛扩增子类型(富含 GC 和 AT)的不一致扩增。KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒能够实现更高的过程性和比活性，这转化为稳健的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的耐受性改善。KAPA2G 稳健 DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的 PCR 应用和困难的样本，无需使用多种酶和方案进行优化。

应用

KAPA2G Robust HotStart^?PCR试剂盒已用于：

• 唾液样本的PCR扩增
• PCR扩增以便进行直接测序
• 巢式PCR
• 扩增富含 GC 或 AT 的模板
• 含有常见 PCR 抑制剂(例如，盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
• 粗制样本 PCR，例如口腔拭子，培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
• 菌落 PCR
• RT-PCR

生化/生理作用

KAPA2G Robust HotStart^?DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型TaqDNA聚合酶产生的DNA片段相似。KAPA2G Robust HotStart聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶；错配率为每1.7 x 10⁵核苷酸约有1个错误。它可用于限制性内切酶消化、克隆和测序。同野生型Taq聚合酶一样，KAPA2G Robust HotStart聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性，但不具有3′→5′外切酶(校正)活性。

特点和优势

高效扩增富含 GC 和 AT 的靶标

• 在各种 GC 和 AT 富集模板中表现稳健
• 提高 PCR 成功率

提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性

• 从粗样品中高效扩增
• 每单位酶的产量和灵敏度更高

菌落 PCR 中无与伦比的性能

• 来自大肠杆菌和酵母细胞的 PCR direct 产量更高，一致性更好

快速注释：

• KAPA2G Robust HotStart PCR Kit 包含 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶，设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
• 纯化的基因组 DNA 和粗样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
• 每 25μ 使用 0.5 UKAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶L 反应。更具挑战性的 PCR(GCrich，粗品)可能需要更高的酶浓度。
• 每个循环使用 15 s/kb 的延伸时间，对于困难的扩增子或模板，增加到 30-60 s/kb。
• KAPA2G 缓冲液含 1.5 mM MgCl₂(1X)。
• 可使用试剂盒中提供的 25 mM MgCl₂溶液添加额外的 MgCl₂。
• KAPA2G 缓冲液 A 针对高产量、高特异性和高灵敏度进行了优化。
• 推荐将 KAPA2G 缓冲液 B 用于抑制剂污染的模板样品。
• KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR ( 70%GC)。
• KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用，尤其是用于富含 GC 的检测。
• 反应产物具有 3′-dA 尾式，可克隆至 TA 克隆载体。

质量

每批 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶经确认含<2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。KAPA2G Robust HotStart PCR kits 经过严格的质量控制测试，没有污染的外切和内切核酸酶活性，满足 DNA 污染水平方面的严格要求。

制备说明

在每次使用前，应确保半岛bd体育手机客户端 已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存4℃条件下(最长1个月)。长期储存时，应将试剂放回-20℃环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染，则在室温下(无意地)短时间(最多3天)放置，预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4℃下长期保存。请注意，储存在高于-20℃的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此在此温度下储存的风险由用户自负。

其他说明

仅用于研究目的。不用于诊断程序。

法律信息

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

基本信息

NACRES

NA.55

半岛bd体育手机客户端 性质

质量水平	100
用途	sufficient for 1000 reactions sufficient for 200 reactions sufficient for 500 reactions sufficient for 5000 reactions
保质期	≤12 mo.
特点	Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR dNTPs included: no hotstart
包装	pkg of 100 U (KK5522) pkg of 250 U (KK5515) pkg of 2500 U (KK5525) pkg of 500 U (KK5517)
manufacturer/tradename	Roche
technique(s)	PCR: suitable
input	crude DNA
运输	dry ice
储存温度	?20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号	组份
	KAPA2G Robust Standard or HotStart?DNA Polymerase 5 U/μL
	5X KAPA2G Buffer A
	5X KAPA2G Buffer B
	5X KAPA2G GC Buffer with MgCl2
	5X KAPA Enhancer 1
	MgCl225 mM

安全信息

象形图
警示用语：	Warning
危险声明	H302 - H371 - H412
预防措施声明	P260 - P264 - P270 - P273 - P308 + P311 - P501
危险分类	Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2
储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 1
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash