半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

第二代KAPA2G Robust DNA聚合酶可用于解决多种扩增子类型(GC- 和AT-rich)的不一致扩增问题。该半岛bd体育手机客户端 实现了更高的持续性和特异性活性，这意味着稳健的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的更高耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合挑战性 PCR 应用和样本，避免了使用多种酶和方案进行优化。

应用

KAPA2G Robust HotStart^?PCR 试剂盒已用于：

• 扩增富含 GC 或 AT 的模板
• 含有常见 PCR 抑制剂(例如，盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
• 粗制样本 PCR，例如口腔拭子，培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
• 菌落 PCR
• qPCR
• 嵌套聚合酶链式反应(PCR)扩增
• PCR 内 DNA 靶标的扩增
• 使用传统 PCR 进行 DNA 扩增
• 常规PCR

生化/生理作用

KAPA2G Robust HotStart^?DNA 聚合酶生成的 DNA 片段与野生型TaqDNA 聚合酶生成的 DNA 片段具有相同的特征。它可用于常规下游应用，如限制性内切酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样，KAPA2G Robust HotStart 具有 5′→3′聚合酶和 5'→3′ 核酸外切酶活性，但是没有 3'→5′ 核酸外切酶(校正)活性。KAPA2G Robust HotStart 的精确性与野生型Taq相近。错配率约为每结合 1.7 x 10⁵个核甘酸错配 1 次。

特点和优势

有效扩增富含 GC 和 AT 的靶标

• 强力扩增富含 GC 和 AT 的模板
• 提高 PCR 成功率

改善对常见 PCR 抑制剂的耐受性

• 从粗样本中有效扩增
• 每单位酶的产率和灵敏度更高

在菌落 PCR 中具有无与伦比的性能

• 在大肠杆菌和酵母细胞直接 PCR 中具有更高的产量和更好的一致性

快速注释：

• KAPA2G Robust HotStart^?PCR 试剂盒(含 dNTP)含有 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶，专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
• 纯化的基因组 DNA 和粗制样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
• 每 25 μL 或更低体积的反应使用 0.5 U KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶。更具挑战性的 PCR(富含 GC，粗制样本)可能需要更高的酶浓度。
• 每个循环的延伸时间设置为 15 sec/kb，对于困难扩增子或模板，增加到 30-60 sec/kb。
• 含有1.5mM MgCl₂的 KAPA2G 缓冲液(1X)。
• 可以使用试剂盒中提供的 25mM MgCl₂溶液额外添加 MgCl₂。
• KAPA2G 缓冲液 A 经过优化，具有高产量、特异性和灵敏度。
• KAPA2G 缓冲液 B 推荐用于抑制剂污染的模板样品。
• KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR(>70% GC)。
• KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用，特别适用于富含 GC 的 PCR 试验。
• 反应产物是3′-dA尾的，可以克隆到TA克隆载体中。

质量

每批次 KAPA2G Robust HotStart^?DNA 聚合酶均已确认含有 <2％ 的污染蛋白(Agilent Protein 230 分析)。KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试，没有污染外源和内切酶活性，符合 DNA 污染水平的严格要求。

制备说明

在每次使用前，应确保半岛bd体育手机客户端 已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存 4℃ 条件下(最长 1 个月)。长期储存时，应将试剂放回 -20℃ 环境中。如果所有组份在使用过程中非常仔细，没有受到污染，则试剂盒在短时间内(最多 3 天)被放置在室温下(无意中)预计不会失效。不建议在室温和 4℃ 下长期储存。请注意，在 -20℃ 以上的温度下储存的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此在超过 -20℃ 的温度下储存的风险由用户自己承担。

其他说明

仅供研究使用。不可用于诊断操作。

法律信息

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

基本信息

NACRES

NA.55

半岛bd体育手机客户端 性质

质量水平	100
用途	sufficient for 1000 reactions sufficient for 200 reactions sufficient for 500 reactions
保质期	≤12 mo.
特点	Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR dNTPs included hotstart
包装	pkg of 100 U (KK5532) pkg of 250 U (KK5516) pkg of 500 U (KK5518)
manufacturer/tradename	Roche
technique(s)	PCR: suitable
input	crude DNA
运输	dry ice
储存温度	?20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号	组份
	KAPA2G Robust HotStart?DNA Polymerase 5 U/?L
	5X KAPA2G Buffer A
	5X KAPA2G Buffer B
	5X KAPA2G GC Buffer
	5X KAPA Enhancer 1
	KAPA MgCl225 mM
	KAPA dNTP Mix 10 mM each

安全信息

象形图
警示用语：	Warning
危险声明	H302 - H371 - H412
预防措施声明	P260 - P264 - P270 - P273 - P308 + P311 - P501
危险分类	Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2
储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 1
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash