半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型(富含GC和AT的扩增子)扩增不一致的问题。KAPA2G Robust PCR试剂盒表现更高的持续合成能力和特异性，从而可实现稳定的PCR性能、高灵敏度和改善的常见抑制剂耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合挑战性 PCR 应用和样本，避免了使用多种酶和方案进行优化。
该酶配有三种反应缓冲液，以及一种高GC含量PCR专用增强剂。KAPA2G缓冲液A针对KAPA2G改良酶特性专门配制。KAPA2G缓冲液B推荐用于被PCR抑制剂污染的模板样品。KAPA2G缓冲液GC推荐用于高GC含量PCR。KAPA增强剂1是专有的DNA去稳定剂，可与KAPA2G缓冲液A或B共同用于高GC含量检测，或复杂二级结构检测。

应用

KAPA2G 稳健 PCR 试剂盒已用于：

• 富含 GC 或 AT 模板的扩增和基因扩增
• 含有常见 PCR 抑制剂(例如，盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
• 粗制样本 PCR，例如口腔拭子，培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
• 菌落 PCR
• 常规PCR
• PCR扩增
• 禽痘病毒特异性PCR
• 单重PCR
• 半定量PCR

生化/生理作用

KAPA2G Robust聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶，错配率为每1.7 x 10⁵核苷酸约有1个错误。KAPA2G Robust DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型TaqDNA聚合酶产生的DNA片段的性质相同，可用于限制性内切酶消化、克隆和测序应用。同野生型Taq聚合酶一样，KAPA2G Robust聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性，但不具有3′→5′外切酶(校正)活性。

特点和优势

高效扩增富含 GC 和 AT 的靶标

• 在广泛的 GC 和 AT 富集模板中表现稳健
• 提高 PCR 成功率

提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性

• 从粗样品中高效扩增
• 单位酶的产量和灵敏度更高

菌落 PCR 中无与伦比的性能

• 大肠杆菌和酵母细胞直接 PCR 的高产率和一致性

快速注释：

• KAPA2G Robust PCR 试剂盒包含 KAPA2G Robust DNA 聚合酶，设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
• 纯化的基因组 DNA 和粗样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
• 每 25 μL 反应使用 0.5 UKAPA2G 耐用 DNA 聚合酶。更具挑战性的 PCR(GCrich，粗品)可能需要更高的酶浓度。
• 每个循环使用 15 s/kb 的延伸时间，对于困难的扩增子或模板则增加到 30-60 s/kb。
• 1X 时，KAPA2G 缓冲液含 1.5 mM MgCl₂。
• 可使用试剂盒中提供的 25 mM MgCl₂溶液添加额外的 MgCl₂。
• KAPA2G 缓冲液 A 针对高产量、高特异性和高灵敏度进行了优化。
• 推荐将 KAPA2G 缓冲液 B 用于抑制剂污染的模板样品。
• KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR (> 70%GC)。
• KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用，尤其是用于富含 GC 的检测。
• 反应产物为 3′-dA-尾，可克隆至 TA 克隆载体。

质量

每批 KAPA2G 耐用 DNA 聚合酶经确认含 < 2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。 KAPA2G 耐用 PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试，没有污染外源和内切酶活性，符合 DNA 污染水平的严格要求。

制备说明

使用前务必确保半岛bd体育手机客户端 已完全解冻并混合。试剂可在 4℃ 条件下保存，供短期使用(最长 1 个月)。放回 -20℃ 条件下长期保存。如果所有组件均已小心处理且未被污染，则如果在室温下(无意中)短时间(长达 3 天)放置，试剂盒预期不会受损。不建议在室温和 4℃ 条件下长期保存。请注意，在-20℃ 以上温度下储存的试剂在使用过程中受到污染时更容易发生降解，因此在这种温度下储存由用户自行承担风险。

其他说明

仅用于研究目的。不用于诊断程序。

基本信息

NACRES

NA.55

半岛bd体育手机客户端 性质

用途	sufficient for 200 reactions sufficient for 500 reactions
质量水平	100
保质期	≤12 mo.
特点	Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR dNTPs included hotstart: no
包装	pkg of 100 U (KK5023) pkg of 250 U (KK5024)
manufacturer/tradename	Roche
technique(s)	PCR: suitable
input	crude DNA
运输	dry ice
储存温度	?20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号	组份
	KAPA2G Robust Standard or HotStart?DNA Polymerase 5 U/μL
	5X KAPA2G Buffer A with MgCl2
	5X KAPA2G Buffer B with MgCl2
	5X KAPA2G GC Buffer with MgCl2
	5X KAPA Enhancer 1
	MgCl225 mM

安全信息

象形图
警示用语：	Warning
危险声明	H302 - H371 - H412
预防措施声明	P260 - P264 - P270 - P273 - P308 + P311 - P501
危险分类	Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2
储存分类代码	12 - Non Combustible Liquids
WGK	WGK 1
闪点(F)	does not flash
闪点(C)	does not flash