半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

经过优化的WTA2，可对福尔马林固定的石蜡包埋样品(FFPE)和其他受损或降解样本中的RNA进行扩增。全转录组扩增(WTA)技术可在4小时内对ng级的总RNA进行无3′偏差的代表性扩增。扩增产物适用于qPCR、微阵列分析和克隆等应用。WTA2试剂盒含有cDNA文库扩增所需的聚合酶。

应用

完整全转录组扩增试剂盒用于：

• 建立同时分析猪粪DNA和RNA病毒的实验方案。(通过可控工艺深度测序同时鉴定猪粪中存在的DNA和RNA病毒)
• 逆转录和cDNA扩增
• 使用免疫捕获PPV颗粒中释放的RNA进行cDNA文库合成和扩增
• 核酸制备和深度测序(提取的核酸使用随机引物进行cDNA合成)

适于各种下游应用，包括：

• qPCR
• 微阵列分析
• 克隆

特点和优势

• 在4小时内实现高达10,000x的扩增，并且手动操作时间低于30分钟
• 仅需20 pg的总RNA模板，即可扩增出适用于微阵列分析的cDNA
• 含有cDNA扩增所需的所有元件
• 实现对表达基因和外显子的线性扩增，无3′或5′偏差
• 有效扩增单细胞或小量RNA，包括来自动物、植物或微生物的mRNA和总RNA。

原理

WTA2过程包括2个步骤。第一步，使用由拟随机3′端和通用5′端组成的非自身互补引物对样品RNA进行逆转录。在该过程中，被取代的单链将作为引物退火和延伸的新模板。所得OmniPlex cDNA文库由以通用末端序列为侧翼序列、含100-1000个碱基的随机重叠片段组成。第二步，使用WTA2聚合酶和通用末端引物对cDNA文库进行PCR扩增，生成WTA2产物。

基本信息

NACRES

NA.55

半岛bd体育手机客户端 性质

质量水平	200
technique(s)	whole genome amplification: suitable
运输	wet ice
储存温度	?20℃

组份列表

组份可单独销售

货号	组份
	Library Synthesis Enzyme
	Library Synthesis Solution
	Amplification Mix
	Library Synthesis Buffer
W4502	Water, Nuclease-Free Water, for Molecular Biology
	Amplification Enzyme
D7295	Deoxynucleotide Mix, 10 mM, Molecular Biology Reagent

安全信息

储存分类代码	10 - Combustible liquids
WGK	WGK 3