半岛bd体育手机客户端 说明
一般描述
辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的,属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca2+(约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。
HRP 是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有 18% 碳水化合物的糖蛋白。该碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约 44kDa)包括多肽链(33,890 道尔顿)、氯化血红素(加 Ca2+)(约 700 道尔顿)和碳水化合物(约 9,400 道尔顿)。存在至少 7 种 HRP 同工酶。辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为 3.0-9.0。
应用
该酶长期用于通过使用荧光分光光度法测定烟草 BY-2 细胞中的 H2O2产生。
辣根过氧化物酶(HRP)由辣根(Amoracia rusticana)中分离并属于过氧化物酶的铁卟啉基团,适合蛋白质印迹、ELISA 和免疫组化等生化应用。其作用是扩增弱信号并提高靶标分子(例如蛋白质)的可检测性。半岛bd体育手机客户端 P8415,XII型,是一种基本不含盐的冻干粉。也是半岛bd体育手机客户端 P8375 的进一步纯化的产物,常用于测定溶液中葡萄糖和过氧化物的量。长期用于烟曲霉快速敏感性分析。
来自辣根的过氧化物酶已被用于引发过氧化物酶偶联测定。它还被用于制备β-半乳糖苷酶(β-gal)储备溶液。
包装
500, 1000, 2000, 5000 units in glass bottle
生化/生理作用
当与底物一起孵育时,辣根过氧化物酶可产生标记分子的有色、荧光或发光衍生物,从而实现定量检测。研究表明,辣根过氧化物酶可以略微降低 cydAB 突变体中的抑制水平。已知的抑制剂有叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸,以及 Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+和 Pb2+离子。
HRP 易与过氧化氢(H2O2)结合,生成的 [HRP-H2O2] 络合物可氧化各种氢供体。该酶的最佳 pH 值为 6.0-6.5,在5.0-9.0 的 pH 值范围内最为稳定。HRP 可以通过几种不同的方法与抗体结合,包括戊二醛、高碘酸盐氧化,通过二硫键,以及通过氨基和硫醇定向交联剂。它比酶标记物和 β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定,因此是最理想的标记物。此外,它的糖基化导致较低的非特异性结合。它还可用于测定溶液中的葡萄糖和过氧化物。
其他说明
过氧化物酶 VI(P8375)的进一步纯化产物。
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单位定义
一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下,在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。
制备说明
色谱纯化半岛bd体育手机客户端
分析说明
RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275。 它是血红素含量的量度,而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
初步的等电聚焦数据表明这主要是同工酶 C
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 1.11.1.7 ( BRENDA | IUBMB ) |
EC 号 | 232-668-6 |
MDL编号 | MFCD00071339 |
NACRES | NA.54 |
半岛bd体育手机客户端 性质
质量水平 | 200 |
类型 | Type XII |
形式 | essentially salt-free, lyophilized powder |
specific activity | ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) |
分子量 | ~44 kDa |
溶解性 | 0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0) H2O: soluble |
吸光度比值 | RZ ≥3.0 |
储存温度 | 2-8℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H317 - H334 |
预防措施声明 | P261 - P272 - P280 - P284 - P302 + P352 - P333 + P313 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1 |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 3 |
个人防护装备 | Eyeshields, Gloves, type N95 (US) |
Sigma-Aldrich