【细胞冻存】

半岛bd体育手机客户端 名称待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

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细胞的种类：

第×种：

是冻存半岛bd体育手机客户端 ，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响半岛bd体育手机客户端 的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。

第二种：

是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。

质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的半岛bd体育手机客户端 全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。

【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种半岛游戏平台官网入口网址 设备。
MCRS1 ELISA KitSA1/Nuclear protein stromal antigen 1  粘结蛋白SA1抗体2,4,6-三氯吡啶乌美司进口/国产IFNA16/Interferon alpha 16  干扰α16抗体含量：含量测定

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..SA2  粘结蛋白SA2抗体2,4,6-三氯吡啶阿达唑进口/国产NET1  去上转运蛋白/神经递质去上转运体抗体含量：含量测定

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..phospho-REC8(Ser251)  磷酸化减数分裂重组蛋白家族REC8抗体β-胸苷(dT)磺酸氨地平进口/国产ABCA2  三酸苷结合盒转运蛋白2抗体含量：含量测定

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..SMC2  染色体结构维持蛋白2抗体β-胸苷(dT)盐酸特拉唑嗪进口/国产ApoB/Apolipoprotein B  载脂蛋白B抗体含量：HPLC法含量测定

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..SMC4  染色体结构维持蛋白4抗体三特丁基磷四氟硼酸盐氨力农进口/国产ORP8  化固醇结合蛋白8抗体含量：UV法含量测定

Peptoniphilus asaccharolyticus (Distaso) Ez ..SMC5  染色体结构维持蛋白5抗体三特丁基磷四氟硼酸盐更昔洛韦进口/国产ALOX15B/15 Lipoxygenase 2  花生四酸15脂合酶2抗体含量：含量测定

Fusarium oxysporum f. sp.lupini Snyder e ..SMC6  染色体结构维持蛋白6抗体反-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二胺上色腙进口/国产APOB48R  载脂蛋白B受体抗体含量：含量测定

Tuberculina persicina (Ditmar) SaccardoTRIP1/PSMC5  甲状腺受体相互作用蛋白1抗体反-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二胺大蒜进口/国产ARH/LDL receptor adaptor protein  低密度脂蛋白受体衔接蛋白抗体含量：UV法含量测定
COS-7(SV40 转化的非洲绿猴肾细胞)USP13 ELISA KitRat Ghrl(Appetite-regulating hormone) ELISA Kit4-(2-吡啶基)苯胺组织CaM KIV激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

USP1 ELISA KitRat Nr1i3(Nuclear receptor subfamily 1 group I member 3) ELISA Kit4-(2-吡啶基)苯胺细胞CASEIN KINASE 1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

USP14 ELISA KitRat Jag1(Protein jagged-1) ELISA Kit4-(2-吡啶基)苯胺组织CASEIN KINASE 1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

UROD ELISA KitRat Crhbp(Corticotropin-releasing factor-binding protein) ELISA Kit氯化钯细胞CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

SERPINB6(Serpin B6) ELISA KitRat Ddah2(N(G),N(G)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2) ELISA Kit氯化钯组织CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

UROC1 ELISA KitRat Nes(Nestin) ELISA Kit吡唑细胞CASEIN KINASE 2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

USE1 ELISA KitRat Syp(Synaptophysin) ELISA Kit吡唑组织CASEIN KINASE 2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

UROS ELISA KitRat Cyp3a1(Cytochrome P450 3A1) ELISA Kit酚红细胞CDK1/CYCLIN B激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）