【细胞冻存】

半岛bd体育手机客户端 名称待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

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细胞的种类：

第×种：

是冻存半岛bd体育手机客户端 ，由液氮直接拿出，干运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响半岛bd体育手机客户端 的质量；干运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。

第二种：

是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。

质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的半岛bd体育手机客户端 全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。

【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的晶迅速融化，避免晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种半岛游戏平台官网入口网址 设备。
OPRM1(Mu-type opioid receptor) ELISA KitETHE1  乙基丙二酸脑病蛋白抗体β-四氢萘酮盐酸醇进口/国产CIKS  核因子NFκB激活蛋白1抗体含量：含量测定用

MPP3 ELISA KitGTSE1/G2 and S phase expressed 1  G2期/S期应答相关蛋白1抗体2,2':6',2''-三吡啶盐酸美律进口/国产MYBBP1A/p53 activated protein 2  p53激活蛋白2抗体含量：含量测定

TLR9(Toll-like receptor 9) ELISA KitHIPK4  同源相互作用蛋白激酶4抗体2,2':6',2''-三吡啶盐酸酚苄明进口/国产NCKAP1  膜相关的蛋白质HEM2抗体含量：含量测定

MPPE1 ELISA KitAMBRA1  自噬相关基因AMBRA1抗体2,2':6',2''-三吡啶氢醌进口/国产TMED4  跨膜蛋白TMED4抗体含量：供检查用

MOGAT2 ELISA KitIBRDC2/RNF144B  E3泛素蛋白连接酶144B抗体（环指蛋白144B）4-吲哚硼酸频那醇酯盐酸罗通定进口/国产NRIP  雄激受体复合物相关蛋白抗体（核受体相互作用蛋白）含量：鉴别

MOGAT1 ELISA KitJMY  连接介导调节蛋白抗体4-吲哚硼酸频那醇酯盐酸维拉帕米进口/国产PCMT1  天门冬氨酸转移酶PCMT抗体含量：含量测定

MOK ELISA KitLRDD/PIDD  富含亮氨酸重复死亡结构域蛋白抗体4-吲哚硼酸频那醇酯异维A酸进口/国产ERRB2/Estrogen Related Receptor beta  雌激相关受体β抗体含量：含量测定

MPPED1 ELISA KitMCG10  RNA相关结合蛋白MCG10抗体四乙基四氟硼酸铵贝诺酯进口/国产ESRRG/Estrogen Related Receptor gamma  雌激受体相关蛋白3抗体含量：含量测定
EL4. IL-2(淋巴瘤细胞)WDR5 ELISA KitRat Jun(Transcription factor AP-1) ELISA Kitβ-苯乙胺组织基质金属蛋白酶（MMP-14）活性荧光定量检测试剂盒

WDR46 ELISA KitRat Adra1a(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit焦磷酸体液基质金属蛋白酶（MMP-14）活性荧光定量检测试剂盒

WDR18 ELISA KitRat Drd1(D(1A)dopamine receptor) ELISA Kit对甲氧基苯胺基质金属蛋白酶（MMP）明胶酶谱法（gelatin-zymography）电泳分析试剂盒（MMP2/9）

WDR55 ELISA KitRat STK11(Serine/threonine-protein kinase STK11) ELISA Kit对甲氧基苯胺基质金属蛋白酶（MMP）酪蛋白酶谱法（casein-zymography）电泳分析试剂盒（MMP1/3/7/12/13）

WARS2 ELISA KitRat Prf1(Perforin-1) ELISA Kit2-氰基吡嗪基质金属蛋白酶（MMP）胶原蛋白酶谱法（collagen-zymography）电泳分析试剂盒（MMP1/13）

WDR16 ELISA KitRat Ppp3r1(Calcineurin subunit B type 1) ELISA Kit2-氰基吡嗪基质金属蛋白酶（MMP）羧甲基转铁蛋白（CM transferrin -zymography电泳分析试剂盒（MMP7）

WBP1 ELISA KitRat Prim2(DNA primase large subunit) ELISA Kit醋酸钯细胞/组织蛋白（基质金属蛋白酶）样品制备试剂盒

WBP11 ELISA KitRat Ppme1(Protein phosphatase methylesterase 1) ELISA Kit醋酸钯冻切片基质金属蛋白酶（MMP）原位明胶酶谱法（in situ zymography）荧光染色试剂盒