【细胞冻存】

半岛bd体育手机客户端 名称待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

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细胞的种类：

第×种：

是冻存半岛bd体育手机客户端 ，由液氮直接拿出，干运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响半岛bd体育手机客户端 的质量；干运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。

第二种：

是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。

质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的半岛bd体育手机客户端 全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。

【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的晶迅速融化，避免晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种半岛游戏平台官网入口网址 设备。
NAT10 ELISA KitGAS 6  生长停滞特异性蛋白6抗体5-三氟甲基吡啶-2-甲醇10％A晶型咪唑进口/国产Wnt8A  信号通路WNT8A抗体含量：检查

NDC80 ELISA KitAUP1/Ancient ubiquitous protein 1  原始广泛存在蛋白1抗体5-三氟甲基吡啶-2-甲醇咪唑　进口/国产WNT2  信号通路Wnt2抗体含量：鉴别

NBL1 ELISA KitBiglycan  骨/软骨蛋白多糖1抗体三氯乙腈6--2-萘进口/国产CtIP/RBBP8  视网膜母细胞瘤结合蛋白8抗体含量：TLC法检查用

LIPC(Hepatic triacylglycerol lipase) ELISA KitALT1  谷丙氨酸氨基转移酶1抗体三氯乙腈N-进口/国产EID1  酰转移酶EID1抗体含量：检查

PODXL(Podocalyxin) ELISA KitEph receptor A2+A3+A4  内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗体甲磺酸-2-(二叔丁基膦基)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)卡马平进口/国产KDM5B/PLU1/Jarid1B  组蛋白去化酶JARID1B抗体含量：含量测定

NCOA3 ELISA Kitphospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596)  磷酸化内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗体甲磺酸-2-(二叔丁基膦基)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)酸咯萘啶进口/国产KMT8/Riz1/Riz2  转录因子GATA3结合蛋白G3B抗体含量：含量测定

NCOA5 ELISA Kitphospho-EPH A3+A4+A5 ( Tyr779)  磷酸化内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶A3+A4+A5抗体硫代羟基乙酸酐氨酯进口/国产GLIPR1  脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体含量：含量测定

NCOA6 ELISA KitFLAP/5-lipoxygenase activating protein  5脂氧合酶激活蛋白抗体硫代羟基乙酸酐哈德进口/国产RING1  环指蛋白1抗体含量：含量测定
SAC-IIC3(腹水瘤细胞)YME1L1 ELISA KitRat Apaf1(Apoptotic protease-activating factor 1) ELISA KitO-苄基-D-丝氨酸组织逆转录酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性荧光定量检测试剂盒

XRCC2 ELISA KitRat Aifm1(Apoptosis-inducing factor 1, mitochondrial) ELISA KitO-苄基-D-丝氨酸血液逆转录酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性荧光定量检测试剂盒

YOD1 ELISA KitRat Pyy(Peptide YY) ELISA KitO-苄基-D-丝氨酸血液逆转录酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性荧光定量检测试剂盒

PDE1C(Calcium/calmodulin-dependent 3′,5′-cyclic nucleotide phosphodiesterase 1C) ELISA KitRat ABCC1(Multidrug resistance-associated protein 1) ELISA KitO-苄基-D-丝氨酸细胞基质金属蛋白酶（MMP）总活性荧光定量检测试剂盒

XRCC5/Ku80(X-ray repair cross-complementing protein 5) ELISA KitRat Tpsab1(Tryptase,Mast cell protease 7) ELISA Kit邻甲苯胺组织基质金属蛋白酶（MMP）总活性荧光定量检测试剂盒

XRCC4 ELISA KitRat Sct(Secretin) ELISA KitO-叔丁基-N,N'-二异丙基异脲体液基质金属蛋白酶（MMP）总活性荧光定量检测试剂盒

WIPI1 ELISA KitRat Aoc3(Membrane primary amine oxidase) ELISA KitO-叔丁基-N,N'-二异丙基异脲细胞基质金属蛋白酶（MMP）总活性比色法定量检测试剂盒

XAB2 ELISA KitRat Gal(Galanin peptides) ELISA KitO-叔丁基-N,N'-二异丙基异脲组织基质金属蛋白酶（MMP）总活性比色法定量检测试剂盒