一、概要
黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液、动物饲料相关的半岛bd体育手机客户端 中。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染频率均居于首位。薄层色谱一直是检测黄曲霉毒素常用的方法,但是此方法制备样品及分析样品时费时又费力。而使用黄曲霉毒素B1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素B1残留。
本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测半岛bd体育手机客户端 ,操作时间仅需20min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素B1抗原,样本中黄曲霉毒素B1和此抗原竞争抗黄曲霉毒素B1抗体(抗试剂),同时抗黄曲霉毒素B1抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素B1成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中黄曲霉毒素B1的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测饲料及饲料原料样品中黄曲霉毒素B1的含量。
四、交叉反应率
AFB1 ……………………………………………… 100%
AFB2 ……………………………………………… 38%
AFG1 ……………………………………………… 27%
AFG2 ……………………………………………… 4%
AFM1 ……………………………………………… 20%
AFM2 ……………………………………………… <1%
五、样本前处理步骤
饲料原料及饲料样本处理方法:
粉碎并称取样本中,加入60%甲醇,剧烈振荡,取液体离心;取上清或滤液,加入去离子水(稀释后的液体 pH 值应保证在 7~8 之间,可用 1M“NaOH”或“HCl”进行调节),振荡, 取 50μL 进行分析。
六、操作步骤
1、将所需试剂回温;
2、取出需要数量的微孔板;
3、洗涤工作液回温;
4、编号;
5、加标准品/样本;
6、洗板;
7、显色;
8、测定。
七、结果判定
1、粗略判定
2、定量分析
八、检测方法检测限、回收率、精密度
试剂盒灵敏度:0.1?g/kg
检测限:
饲料原料及饲料成品 ……………………………… 2.5?g/kg
回收率:
饲料原料及饲料成品 ……………………………… 90±15%
精密度:
试剂盒的变异系数均小于10%
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该半岛bd体育手机客户端 有效期为12个月。