鍑濊兌娓楅€忚壊璋?Gel Permeation Chromatography銆丟PC)1964骞达紝鐢盝.C.Moore棣栧厛鐮旂┒鎴愬姛銆備笉浠呭彲鐢ㄤ簬灏忓垎瀛愮墿璐ㄧ殑鍒嗙鍜岄壌瀹氾紝鑰屼笖鍙互鐢ㄦ潵鍒嗘瀽鍖栧鎬ц川鐩稿悓鍒嗗瓙浣撶Н涓嶅悓鐨勯珮鍒嗗瓙鍚岀郴鐗┿€?鑱氬悎鐗╁湪鍒嗙鏌变笂鎸夊垎瀛愭祦浣撳姏瀛︿綋绉ぇ灏忚鍒嗙寮€锛夈€侟/span>

1銆佸垎绂诲師鐞咟br/>銆€銆€璁╄娴嬮噺鐨勯珮鑱氱墿婧舵恫閫氳繃涓€鏍瑰唴瑁呬笉鍚屽瓟寰勭殑鑹茶氨鏌憋紝鏌变腑鍙緵鍒嗗瓙閫氳鐨勮矾寰勬湁绮掑瓙闂寸殑闂撮殭锛堣緝澶э級鍜岀矑瀛愬唴鐨勯€氬瓟锛堣緝灏忥級銆傚綋鑱氬悎鐗╂憾娑叉祦缁忚壊璋辨煴鏃讹紝杈冨ぇ鐨勫垎瀛愯鎺掗櫎鍦ㄧ矑瀛愮殑灏忓瓟涔嬪锛屽彧鑳戒粠绮掑瓙闂寸殑闂撮殭閫氳繃锛岄€熺巼杈冨揩锛涜€岃緝灏忕殑鍒嗗瓙鍙互杩涘叆绮掑瓙涓殑灏忓瓟锛岄€氳繃鐨勯€熺巼瑕佹參寰楀銆傜粡杩囦竴瀹氶暱搴︾殑鑹茶氨鏌憋紝鍒嗗瓙鏍规嵁 鐩稿鍒嗗瓙璐ㄩ噺琚垎寮€锛岀浉瀵瑰垎瀛愯川閲忓ぇ鐨勫湪鍓嶉潰锛堝嵆娣嬫礂鏃堕棿鐭級锛岀浉瀵瑰垎瀛愯川閲忓皬鐨勫湪鍚庨潰锛堝嵆娣嬫礂鏃堕棿闀匡級銆傝嚜璇曟牱杩涙煴鍒拌娣嬫礂鍑烘潵锛屾墍鎺ュ彈鍒扮殑娣嬪嚭娑叉€讳綋绉О涓鸿璇曟牱鐨勬穻鍑轰綋绉€ 褰撲华鍣ㄥ拰瀹為獙鏉′欢纭畾鍚庯紝婧惰川鐨勬穻鍑轰綋绉笌鍏 鍒嗗瓙閲忔湁鍏筹紝鍒嗗瓙閲忔剤澶э紝鍏舵穻鍑轰綋绉剤灏忋€
銆€銆€锛?锛 浣撶Н鎺掗櫎
銆€銆€锛?锛夐檺鎬ф墿鏁
銆€銆€锛?锛 娴佸姩鍒嗙
2銆佹牎姝ｅ師鐞咟br/>銆€銆€鐢ㄥ凡鐭ョ浉瀵瑰垎瀛愯川閲忕殑鍗曞垎鏁ｆ爣鍑嗚仛鍚堢墿棰勫厛鍋氫竴鏉℃穻娲椾綋绉垨娣嬫礂鏃堕棿鍜岀浉瀵瑰垎瀛愯川閲忓搴斿叧绯 鏇茬嚎锛岃绾跨О涓衡€滄牎姝ｆ洸绾库€濄€傝仛鍚堢墿涓嚑涔庢壘涓嶅埌鍗曞垎鏁ｇ殑鏍囧噯鏍凤紝涓€鑸敤绐勫垎甯冪殑璇曟牱浠ｆ浛銆傚湪鐩稿悓鐨勬祴璇曟潯浠朵笅锛屽仛涓€绯诲垪鐨凣PC鏍囧噯璋卞浘锛屽搴斾笉鍚岀浉瀵瑰垎瀛愯川閲忔牱鍝佺殑淇濈暀鏃堕棿锛屼互lgM瀵箃浣滃浘锛屾墍寰楁洸绾垮嵆涓衡€滄牎姝ｆ洸绾库€濄€傞€氳繃鏍℃鏇茬嚎锛屽氨鑳戒粠GPC璋卞浘涓婅绠楀悇绉嶆墍闇€鐩稿鍒嗗瓙璐ㄩ噺涓庣浉瀵瑰垎瀛愯川閲忓垎甯冪殑淇℃伅銆傝仛鍚堢墿涓兘澶熷埗寰楁爣鍑嗘牱鐨勮仛鍚堢墿绉嶇被骞朵笉澶氾紝娌℃湁鏍囧噯鏍风殑鑱氬悎鐗╁氨涓嶅彲鑳芥湁鏍℃鏇茬嚎锛屼娇鐢℅PC鏂规硶涔熶笉鍙兘寰楀埌鑱氬悎鐗╃殑鐩稿鍒嗗瓙璐ㄩ噺鍜岀浉瀵瑰垎瀛愯川閲忓垎甯冦€傚浜庤繖绉嶅彲浠ヤ娇鐢ㄦ櫘閫傛牎姝ｅ師鐞嗐€侟br/> 3銆佹櫘閫傛牎姝ｅ師鐞咟br/>銆€銆€鐢变簬GPC瀵硅仛鍚堢墿鐨勫垎绂绘槸鍩轰簬鍒嗗瓙娴佷綋鍔涘浣撶Н锛屽嵆瀵逛簬鐩稿悓鐨勫垎瀛愭祦浣撳姏瀛︿綋绉紝鍦ㄥ悓涓€涓繚鐣欐椂闂存祦鍑猴紝鍗虫祦浣撳姏瀛︿綋绉浉鍚屻€
銆€銆€涓ょ鏌旀€ч摼鐨勬祦浣撳姏瀛︿綋绉浉鍚岋細
銆€銆€[畏]1M1=[畏]2M2
銆€銆€k1M1伪1+1=k1M2伪2+1
銆€銆€涓よ竟鍙栧鏁帮細lgk1+(伪1+1)lgM1=lgk2+(伪2+1)lgM2
銆€銆€鍗冲鏋滃凡鐭ユ爣鍑嗘牱鍜岃娴嬮珮鑱氱墿鐨刱銆佄卞€硷紝灏卞彲浠ョ敱宸茬煡鐩稿鍒嗗瓙璐ㄩ噺鐨勬爣鍑嗘牱鍝丮1鏍囧畾寰呮祴鏍峰搧鐨勭浉瀵瑰垎瀛愯川閲廙2銆侟/span>

鐩存帴娉曪細鍦ㄦ祴瀹氭穻鍑烘恫娴撳害鐨勫悓鏃舵祴瀹氬叾绮樺害鎴栧厜鏁ｅ皠锛屼粠鑰屾眰鍑哄叾鍒嗗瓙閲忋€侟br/> 闂存帴娉曪細鐢ㄤ竴缁勫垎瀛愰噺涓嶇瓑鐨勩€佸崟鍒嗘暎鐨勮瘯鏍蜂负鏍囧噯鏍峰搧锛屽垎鍒祴瀹氬畠浠殑娣嬪嚭浣撶Н鍜屽垎瀛愰噺锛屽垯鍙‘瀹氫簩鑰呬箣闂寸殑鍏崇郴銆侟/span>

1銆佷华鍣?br/> GPC浠殑缁勬垚锛氭车绯荤粺銆侊紙鑷姩锛夎繘鏍风郴缁熴€佸嚌鑳惰壊璋辨煴銆佹娴嬬郴缁熷拰鏁版嵁閲囬泦涓庡鐞嗙郴缁熴€侟br/> 1.1銆佹车绯荤粺锛氬寘鎷竴涓憾鍓傚偍瀛樺櫒銆佷竴濂楄劚姘旇缃拰涓€涓珮鍘嬫车銆傚畠鐨勫伐浣滄槸浣挎祦鍔ㄧ浉锛堟憾鍓傦級浠ユ亽瀹氱殑娴侀€熸祦鍏ヨ壊璋辨煴銆傛车鐨勫伐浣滅姸鍐靛ソ鍧忕洿鎺ュ奖鍝嶇潃鏈€缁堟暟鎹殑鍑嗙‘鎬с€傝秺鏄簿瀵嗙殑浠櫒锛岃姹傛车鐨勫伐浣滅姸鎬佽秺绋冲畾銆傝姹傛祦閲忕殑璇樊搴旇浣庝簬0.01mL/min銆侟br/> 1.2銆佽壊璋辨煴锛欸PC浠垎绂荤殑鏍稿績閮ㄤ欢銆傛槸鍦ㄤ竴鏍逛笉閿堥挗绌哄績缁嗙涓姞鍏ュ瓟寰勪笉鍚岀殑寰矑浣滀负濉枡銆傛瘡鏍硅壊璋辨煴閮芥湁涓€瀹氱殑鐩稿鍒嗗瓙璐ㄩ噺鍒嗙鑼冨洿鍜屾笚閫忔瀬闄愶紝鑹茶氨鏌辨湁浣跨敤鐨勪笂闄愬拰涓嬮檺銆傝壊璋辨煴鐨勪娇鐢ㄤ笂闄愭槸褰撹仛鍚堢墿鏈€灏忕殑鍒嗗瓙鐨勫昂瀵告瘮鑹茶氨鏌变腑鏈€澶х殑鍑濊兌鐨勫昂瀵歌繕澶э紝杩欐椂楂樿仛鐗╄繘鍏ヤ笉浜嗗嚌鑳堕绮掑瓟寰勶紝鍏ㄩ儴浠庡嚌鑳堕绮掑閮ㄦ祦杩囷紝杩欏氨娌℃湁杈惧埌鍒嗙涓嶅悓鐩稿鍒嗗瓙璐ㄩ噺鐨勯珮鑱氱墿鐨勭洰鐨勩€傝€屼笖杩樻湁鍫靛鍑濊兌瀛旂殑鍙兘锛屽奖鍝嶈壊璋辨煴鐨勫垎绂绘晥鏋滐紝闄嶄綆鍏朵娇鐢ㄥ鍛姐€傝壊璋辨煴鐨勪娇鐢ㄤ笅闄愬氨鏄綋鑱氬悎鐗╀腑鏈€澶у昂瀵哥殑鍒嗗瓙閾炬瘮鍑濊兌瀛旂殑鏈€灏忓瓟寰勮繕瑕佸皬锛岃繖鏃朵篃娌℃湁杈惧埌鍒嗙涓嶅悓鐩稿鍒嗗瓙璐ㄩ噺鐨勭洰鐨勩€傛墍浠ュ湪浣跨敤鍑濊兌鑹茶氨浠祴瀹氱浉瀵瑰垎瀛愯川閲忔椂锛屽繀椤婚鍏堥€夋嫨濂戒笌鑱氬悎鐗╃浉瀵瑰垎瀛愯川閲忚寖鍥寸浉閰嶇殑鑹茶氨鏌便€侟br/> 1.3銆佸～鏂欙紙鏍规嵁鎵€浣跨敤鐨勬憾鍓傞€夋嫨濉枡锛屽濉枡鏈€鍩烘湰鐨勮姹傛槸濉枡涓嶈兘琚憾鍓傛憾瑙ｏ級锛氫氦鑱旇仛鑻箼鐑嚌鑳讹紙閫傜敤浜庢湁鏈烘憾鍓傦紝鍙€愰珮娓╋級銆佷氦鑱旇仛涔欓吀涔欑儻閰嚌鑳讹紙鏈€楂?00鈩冿紝閫傜敤浜庝箼閱囥€佷笝閰竴绫绘瀬鎬ф憾鍓傦級澶氬瓟纭呯悆锛堥€傜敤浜庢按鍜屾湁鏈烘憾鍓傦級銆佸瀛旂幓鐠冦€佸瀛旀哀鍖栭摑锛堥€傜敤浜庢按鍜屾湁鏈烘憾鍓?
1.4銆佹煴瀛愶細鐜荤拑銆佷笉閿堥挗
1.5銆佹娴嬬郴缁燂細閫氱敤鍨嬫娴嬪櫒锛氶€傜敤浜庢墍鏈夐珮鑱氱墿鍜屾湁鏈哄寲鍚堢墿鐨勬娴嬨€傛湁绀哄樊鎶樺厜浠娴嬪櫒銆佺传澶栧惛鏀舵娴嬪櫒銆佺矘搴︽娴嬪櫒銆侟br/> 1.6銆佺ず宸姌鍏変华妫€娴嬪櫒锛氭憾鍓傜殑鎶樺厜鎸囨暟涓庤娴嬫牱鍝佺殑鎶樺厜鎸囨暟鏈夊敖鍙兘澶х殑鍖哄埆銆侟br/> 1.7銆佺传澶栧惛鏀舵娴嬪櫒锛氬湪婧惰川鐨勭壒寰佸惛娉㈤暱闄勮繎婧跺墏娌℃湁寮虹儓鐨勫惛鏀躲€侟br/> 1.8銆侀€夋嫨鍨嬫娴嬪櫒锛氶€傜敤浜庡璇ユ娴嬪櫒鏈夌壒娈婂搷搴旂殑楂樿仛鐗╁拰鏈夋満鍖栧悎鐗┿€傛湁绱銆佺孩澶栥€佽崸鍏夈€佺數瀵兼娴嬪櫒绛夈€侟/span>

2銆佹搷浣淈br/> 2.1銆佹憾鍓傜殑閫夋嫨锛 鑳芥憾瑙ｅ绉嶈仛鍚堢墿锛涗笉鑳借厫铓€浠櫒閮ㄤ欢锛涗笌妫€娴嬪櫒鐩稿尮閰嶃€侟br/> 2.2銆佹妸婵€鍏夊厜鏁ｅ皠涓庡嚌鑳惰壊璋变华鑱旂敤锛屽湪寰楀埌娴撳害璋卞浘鐨勫悓鏃讹紝杩樺彲寰楀埌鏁ｅ皠鍏夊己瀵规穻鍑轰綋绉殑璋卞浘锛屼粠鑰岃绠楀嚭鍒嗗瓙閲忓垎甯冩洸绾垮拰鏁翠釜璇曟牱鐨勫悇绉嶅钩鍧囧垎瀛愰噺
2.3銆佹縺鍏夊厜鏁ｅ皠瀹為獙涓繀椤诲鏍峰搧涓ユ牸闄ゅ皹锛屾憾娑蹭腑鐨勭伆灏樹細浜х敓寮虹儓鐨勫厜鏁ｅ皠锛屼弗閲嶅共鎵拌仛鍚堢墿婧舵恫鍏夋暎灏勭殑娴嬮噺銆傛憾娑查櫎灏樻槸鍏夋暎灏勬垚璐ョ殑鍏抽敭銆傞鍏堟槸婧跺墏闄ゅ皹锛岄厤缃祴璇曟牱鍝佺殑婧跺墏搴旇繘琛岀簿棣忥紝骞剁粡杩?.2渭m瓒呮护鑶滆繃婊ゅ悗鏂瑰彲浣跨敤銆傞厤濂界殑婧舵恫涔熻鐢?.2渭m鐨勮秴婊よ啘杩囨护銆傚彟澶栵紝娴嬭瘯涓墍鐢ㄧ殑鍣ㄦ锛屽锛氭敞灏勫櫒绛夛紝浣跨敤鍓嶈鐢ㄦ礂娑叉蹈娉★紝娓呮按寮哄姏鍐叉礂銆侟/span>