半岛bd体育手机客户端 介绍

此半岛bd体育手机客户端 源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。此半岛bd体育手机客户端 不分泌可检测到的病毒颗粒，XC斑点形成试验阴性。可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖。可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导分解红血球但对肿瘤靶细胞无作用。

半岛bd体育手机客户端 特性

1） 来源：鼠科白血病病毒诱导的肿瘤；单核细胞；巨噬细胞

2） 形态：不规则圆形，纺锤状，贴壁细胞，少量悬浮。

3） 含量：>1x10^6  数量

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及半岛bd体育手机客户端 有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照半岛bd体育手机客户端 接收后的处理方法操作。

半岛bd体育手机客户端 接收后的处理

1）收到半岛bd体育手机客户端 后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现瓶子破损、有液溢出及半岛bd体育手机客户端 有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认半岛bd体育手机客户端 状态，同时给刚收到的半岛bd体育手机客户端 拍照（10×，20×）各2-3张以及瓶子外观照片一张留存，作为售后时收到时半岛bd体育手机客户端 状态的依据。

3）贴壁半岛bd体育手机客户端 ：半岛bd体育手机客户端 在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察半岛bd体育手机客户端 的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对半岛bd体育手机客户端 进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到半岛bd体育手机客户端 后**次传代建议T25培养瓶1：2传代 。                      

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺，0.11g / L丙酮酸钠) (推荐iCell-0001)培养基；优质胎牛血清10 %；P/S青霉素-链霉素 1%。

2） 注意事项：

（a）在半岛bd体育手机客户端 生长的初始阶段，半岛bd体育手机客户端 以贴壁的形式生长并呈现出长方体的形态和有“伪足”延伸。随着培养时间的增加，半岛bd体育手机客户端 呈现圆形并以叠加的形式生长。半岛bd体育手机客户端 密度达到一定的程度，会有细胞以悬浮的方式散落到到培养基中，镜下观察会发现悬浮和贴壁的细胞会同时出现。

（b）该半岛bd体育手机客户端 传代时不需要用胰酶消化。传代时，用无菌细胞刮刮拭培养表面将细胞刮落，收集离心后重悬接种到新的培养瓶中。

（c）该半岛bd体育手机客户端 形态上包含松散贴壁的纺锤形和圆形或者立方形。当细胞密度较大时，半岛bd体育手机客户端 会轻微脱落变圆或者许多细胞堆积在一起，有些细胞甚至脱落漂浮。这些漂浮的细胞是存活的，在传代时应收集起来，离心后细胞沉淀可以继续培养。（d）血清质量差异可能引起细胞贴壁能力变化，应选用高质量的胎牛血清。

3） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

该半岛bd体育手机客户端 为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：

该半岛bd体育手机客户端 用刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落，收集细胞后离心去上清，重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后**次传代1:2进行，后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代。

3） 细胞冻存: 收到半岛bd体育手机客户端 后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。