S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。

S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

半岛bd体育手机客户端 组成：

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体30ml×1瓶	4℃
试剂二	粉剂×1瓶	4℃

溶液的配制：

1.试剂二：临用前加入3ml丙酮溶解。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品：

天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、甲苯、丙酮、30-50目筛、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

土样自然风干，过30-50目筛。

二、测定步骤

1.分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，蒸馏水调零。

2.加样表：

	测定管	对照管
风干土样(g)	0.03	0.03
甲苯(μL)	15	15
震荡混匀，室温静置15min。
试剂一(μL)	255	255
试剂二(μL)	30	-
30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。流水冷却至室温。
试剂二(μL)	-	30
14000g常温离心10min，取200μL上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照管。

三、酶活计算公式

A、按微量比色皿计算：

酶活性定义：每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。

S-LAP活性(U/g土样)=ΔA÷(ε×d) ×10⁹×V反总÷W÷T=0.507×ΔA÷W

ε：对硝基苯胺摩尔消光系数：9.87×10³L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，300μL=3×10^-4L；

W：土样质量，g；T：反应时间，60min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。

B、按96孔板计算：

酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。

S-LAP活性(U/g土样)=ΔA÷(ε×d) ×10⁹×V反总÷W÷T=0.844×ΔA÷W

ε：对硝基苯胺摩尔消光系数：9.87×10³L/mol/cm；d：96孔板光径，0.6cm；V反总：反应总体积，300μL=3×10^-4L；

W：土样质量，g；T：反应时间，60min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。