细胞特性：

1)组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

半岛bd体育手机客户端 名称	半岛bd体育手机客户端 简称	货号
TE-1(食管癌细胞)	TE-1	GOY-X6380

特性：

安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

注意事项：

1、观察细胞zui好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KITRat IL-10(Interleukin-10) ELISA KitN,N'-二异丙基碳二亚胺细胞乙醛脱氢酶1活性比色法定量检测试剂盒

ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KITRat IL-13(Interleukin-13) ELISA KitN-异丙基苯胺组织乙醛脱氢酶1活性比色法定量检测试剂盒

AMDHD1 (Probable imidazolonepropionase) ELISA KITRat IL-17(Interleukin-17) ELISA KitN-异丙基苯胺血液乙醛脱氢酶1活性比色法定量检测试剂盒

ADIG (Adipogenin) ELISA KITRat IL-18(Interleukin-18) ELISA Kit乳酸链球菌素细胞乙醛脱氢酶1活性荧光定量检测试剂盒

ARFGEF1 (Brefeldin A-inhibited guanine nucleotide-exchange protein 1) ELISA KITRat IL-2(Interleukin-2) ELISA Kit乳酸链球菌素组织乙醛脱氢酶1活性荧光定量检测试剂盒

FDX1L (Adrenodoxin-like protein, mitochondrial) ELISA KITRat IL-3(Interleukin-3) ELISA KitN-苄氧羰基-L-缬氨酸血液乙醛脱氢酶1活性荧光定量检测试剂盒

ADPRH ([Protein ADP-ribosylarginine] hydrolase) ELISA KITRat IL-4(Interleukin-4) ELISA KitN-苄氧羰基-L-缬氨酸细胞乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒

RRM2(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2) ELISA KitRat IL-6(Interleukin-6) ELISA KitN-Boc-3-苄氧甲基-L-组氨酸组织乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒

TE-1(食管癌细胞)OXCT2 ELISA KitCCDC70 卷曲螺旋结构域蛋白70抗体1,2,4-三氮唑果糖进口/国产Podoplanin Protein/gp36 平足蛋白抗体(淋巴管内皮细胞蛋白)含量：HPLC≥98%

p35 ELISA KitCCDC90A 卷曲螺旋结构域蛋白90A抗体1,2,4-三氮唑芒果苷进口/国产Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗体含量：HPLC≥98%

OXER1 ELISA KitCCDC51 卷曲螺旋结构域蛋白51抗体4-叔丁基-2-羟基苯甲酸新芒果苷进口/国产CD168/RHAMM 透明质酸介导细胞游走受体抗体含量：HPLC≥98%

OXCT2 ELISA KitCCDC125 卷曲螺旋结构域蛋白125抗体4-叔丁基-2-羟基苯甲酸DL-薄荷醇进口/国产polyprotein[Classical swine fever virus, CSFV] 抗猪繁殖与呼吸综合征/猪蓝耳病病抗体含量：HPLC≥98%

p35 ELISA KitCCDC37 卷曲螺旋结构域蛋白37抗体4,4'-硫代二苯硫醇酪醇进口/国产CSFV/Classical swine fever virus 猪瘟病抗体含量：HPLC≥98%

P4HA3 ELISA KitCCDC17 卷曲螺旋结构域蛋白17抗体4,4'-硫代二苯硫醇（R型）人参皂苷Rh1进口/国产CSFV/Classical swine fever virus 猪瘟病抗体含量：HPLC≥98%

OXER1 ELISA KitDCTN1/Dynactin 1 动力蛋白激活蛋白1抗体原甲酸三乙酯滨蒿內酯进口/国产Integrin beta 6 整合β6抗体（Integrin β6）含量：HPLC≥98%

OTOP3 ELISA KitSNF1LK2/SIK2 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SIK2抗体十四氟己烷蝙蝠葛进口/国产IFITM1/CD225 干扰诱导跨膜蛋白1抗体含量：HPLC≥98%