细胞特性：

1)组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

特性：

安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

注意事项：

1、观察细胞zui好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。

实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

CHKA (Choline kinase alpha) ELISA KITPorcine IGF-2(Insulin Like Growth Factor 2) ELISA KitN-乙酰-L-酪氨酸组织过氧化物酶（peroxidase）活性比色法定量检测试剂盒

CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KITPorcine IGFBP-1(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1) ELISA KitN-乙酰-L-酪氨酸血液过氧化物酶（peroxidase）活性比色法定量检测试剂盒

CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KITPorcine IGFBP-2(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2) ELISA KitN-乙酰-L-酪氨酸真菌/酵母过氧化物酶（peroxidase）活性比色法定量检测试剂盒

CNTLN (Centlein) ELISA KITPorcine IGFBP-3(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3) ELISA Kit4,4'-二硝基二苯二硫醚植物过氧化物酶（peroxidase）活性比色法定量检测试剂盒

CHRM1 (Muscarinic acetylcholine receptor M1) ELISA KITPorcine IGFBP-4(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit4,4'-二硝基二苯二硫醚植物NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒

CENPT (Centromere protein T) ELISA KITPorcine IGFBP-7(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7) ELISA KitN-正丁基咪唑酵母NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒

CENPV (Centromere protein V) ELISA KITPorcine IgG(Immunoglobulin G) ELISA KitN-正丁基咪唑真菌NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒

ABCA1(ATP-binding cassette sub-family A member 1) ELISA KitPorcine IgM(Immunoglobulin M) ELISA KitN-正丁基咪唑细胞半胱氨酸蛋白酶-1（CASPASE-1）活性比色法定量检测试剂盒

QGY-7701(肝癌细胞)PEX5L ELISA KitFLIP delta + gamma  凋亡调节蛋白δ+γ抗体2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐水合物柚皮进口/国产VIP Receptor 1/VAPC1  血管活性肠肽受体-1抗体含量：HPLC≥98%

PEX7 ELISA KitPDC6I/Alix  调亡诱导因子6相互作用蛋白/多巴胺受体相互作用蛋白4抗体叔丁基甲醚原花青进口/国产Desmocollin 2  桥粒糖蛋白2/桥粒糖蛋白3抗体含量：UV≥95%

TNMD(Tenomodulin) ELISA KitPEF1  调亡诱导因子家族蛋白PEF1抗体叔丁基甲醚岩白菜进口/国产phospho-PLB(Ser16)  酸化心脏蛋白抗体含量：HPLC≥98%

PFDN4 ELISA KitPHAPI2/APRIL  酸性核磷蛋白32家族B抗体叔丁基甲醚盐酸青藤进口/国产ADM2  中介抗体含量：HPLC≥98%

PFDN5 ELISA KitDRAK1/STK17A  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶17A抗体（DAP凋亡诱导蛋白激酶1）叔丁基甲醚盐酸小檗（黄连）进口/国产CATSPER  阳离子通道相关蛋白1抗体含量：HPLC≥98%

PFKFB2 ELISA KitERN2  内质网核信号转导蛋白2抗体叔丁基甲醚黄连进口/国产Vitamin D Receptor/VDR  维生D3受体抗体含量：HPLC≥98%

PGAP1(Post-GPI attachment to proteins factor 1) ELISA KitA1BG  α1B糖蛋白抗体叔丁基甲醚盐酸黄连进口/国产Mitofusin 2/MFN2  线粒体融合蛋白Mfn2抗体含量：HPLC≥98%

PFKFB3 ELISA KitA1CF/Apo B RNA editing protein  载脂蛋白B-mRNA编码蛋白抗体三环己基膦胡黄连苷-Ⅰ进口/国产ABL2  ABL2蛋白抗体含量：HPLC≥98%