NAMALWA(Burkitt's淋巴瘤细胞)
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NAMALWA
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特性: NAMALWA(Burkitt's 淋巴瘤细胞)安全性:所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况 (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。 (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
特性: 安全性:所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况 (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。 (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下: 1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。 细胞特性: 1)组织来源于实验动物的正常眼组织。 2)细胞鉴定:细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。 3)经鉴定细胞纯度高于90%。 4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。 注意事项: 1、观察细胞zui好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。 3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。 4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们。 GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KITMouse HD3(Histone Deacetylase 3) ELISA KitN,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺冻切片特恩布尔(TURNBULL)铁(二价)染色试剂盒 MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) ELISA KITMouse PDIA4(Protein disulfide-isomerase A4) ELISA KitN,O-双(三甲基硅烷基)乙酰胺细胞特恩布尔(TURNBULL)铁(二价)染色试剂盒 LGALSL (Galectin-related protein) ELISA KITMouse β-actin(Beta actin) ELISA KitN-乙酰-D-半乳糖胺石蜡切片皮尔斯(PERLS-DAB)非血红素铁(三价)强化染色试剂盒 GLCE (D-glucuronyl C5-epimerase) ELISA KITMouse CEBPD(CCAAT/enhancer Binding Protein(C/EBP), delta) ELISA KitN-乙酰-D-半乳糖胺冻切片皮尔斯(PERLS-DAB)非血红素铁(三价)强化染色试剂盒 GLMN (Glomulin) ELISA KITMouse CSF1R(Macrophage colony-stimulating factor 1 receptor) ELISA KitN,N-二乙基对苯二胺细胞皮尔斯(PERLS-DAB)非血红素铁(三价)强化染色试剂盒 GPR65 (Psychosine receptor) ELISA KITMouse ICTP(Cross-linked C-terminal Telopeptide of Type I Collagen) ELISA KitN,N-二乙基对苯二胺石蜡切片特恩布尔(TURNBULL-DAB)非血红素铁(二价)强化染色试剂盒 ARHGAP35 (Rho GTPase-activating protein 35) ELISA KITMouse ADAM10(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10) ELISA Kit萘酚AS-D冻切片特恩布尔(TURNBULL-DAB)非血红素铁(二价)强化染色试剂盒 GFOD1 (Glucose-fructose oxidoreductase domain-containing protein 1) ELISA KITMouse CD26(Dipeptidyl peptidase 4) ELISA Kit萘酚AS-D细胞特恩布尔(TURNBULL-DAB)非血红素铁(二价)强化染色试剂盒 PPPDE1 ELISA KitTestis 肿瘤抑制基因Testin抗体氟化锡(II)Korser氏肉汤 PPP6C ELISA KitZNF288/ZBTB20 锌指蛋白288抗体四乙基乙二醇单甲酯MR-VP PPP4C ELISA KitALOX15/15 Lipoxygenase 1 花生四烯酸15脂氧合酶1抗体四乙基乙二醇单甲酯蛋白胨水(色氨酸肉汤) PPP5C ELISA KitABI3BP ABI基因家族成员3结合蛋白抗体反式-2-己烯醛卫矛醇半固体 PPP1R3F ELISA KitMTCBP1/ADI1 膜型基质金属蛋白酶胞质尾结合蛋白1抗体反式-2-己烯醛山梨醇发酵管 PPT1 ELISA KitBCMP11/AGR3 乳腺癌膜蛋白11抗体(前梯度同源蛋白2)特美汀(新型革兰氏阴性菌抗生素)丙二酸盐 PPP1R7 ELISA KitALDH1A1 胞质乙醛脱氢酶1抗体氧化铽(III,IV)水杨苷发酵管 PPP3CB ELISA KitABH8/ALKBH8 AlkB同源蛋白8抗体氧化铽(III,IV)赖氨酸脱羧酶肉汤 实验报告: 一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4℃箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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