RNA退火缓冲液(5x)
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半岛bd体育手机客户端 介绍
半岛bd体育手机客户端 简介 Annealing Buffer for RNA Oligos (5×),即RNA寡核苷酸退火缓冲液,可以用于RNA Oligos的退火,可以有效避免Oligos自身形成发夹结构,有利于退火的正确进行。该退火缓冲液不含RNase,可避免RNA的降解。 保存条件 常温配送。一个月内,4 oC保存。-20 oC长期保存,至少1年有效。 注意事项 1. RNA易降解,需严格遵守RNA操作规范,防止RNase污染。 2. 本半岛bd体育手机客户端 仅用于科学研究,不得用于临床诊断和治疗,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明 1. 将Oligos用DEPC水配制成200 μM,融化RNA退火缓冲液(5×),混匀备用。 2. 配置如下退火反应体系,混匀。
3. 退火方法一:将退火反应体系置于PCR仪中,设置反应条件:90℃变性1 min,-1℃/60s/cycle缓慢降温至25℃。程序设置以Bio-Rad的T100为例为:1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65X; 4. 4℃, ∞。 4. 退火方法二:将退火反应体系放于90°C水浴锅或金属浴,持续1 min,后将退火反应体系置于一杯含有90°C水的保温杯中,让其开盖自然冷却至室温。 Note:缓慢降温对形成正确的结构是非常有帮助的,降温过快将导致错误高级结构的产生。 5. 退火结束后可以直接用于转染细胞,也可以-80oC冻存备用。
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