半岛bd体育手机客户端 组分

P2061
2×Long Taq Mix	1 ml	1支
PCR Enhancer	0.5 ml	1支
超纯水	1ml	1支
P2062
2×Long Taq Mix	1ml	1支×3
PCR Enhancer	0.5 ml	1支×3
超纯水	1ml	1支×3

注：本半岛bd体育手机客户端 分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的半岛bd体育手机客户端 ，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类半岛bd体育手机客户端 的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。

保存条件
-20℃保存2年。
请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。


半岛bd体育手机客户端 说明
Long Taq Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时，仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染(加样次数减少)。同时，由于体系内含有优化剂与增强剂，能够显著增强PCR扩增的灵敏度。
LongTaq DNA聚合酶的保真性是Taq DNA聚合酶的3倍，简单模板的扩增长度可达40 kb。在扩增复杂模板(如GC-rich或重复序列)时，LongTaq DNA聚合酶的扩增效率显著高于Taq DNA聚合酶，特别适合复杂模板的PCR扩增。扩增产物具有两种末端：平末端与3'-dA突出末端。

半岛bd体育手机客户端 特点
使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
可重复：降低污染和加样错误风险。

半岛bd体育手机客户端 用途
长链复杂模板PCR扩增
高通量、高重复性长链复杂模板PCR扩增

活性定义
一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制
相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，扩增活性无明显改变。

2×Long Taq Mix的组分
100 mM KCl
20 mM Tris-Cl
3 mM MgCl₂
400 mM dNTPs
0.1 U/μl PlusTaq DNA聚合酶
溴酚蓝等

应用举例
注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

以λDNA为模板，扩增10kb片段。

λ DNA(2.5 ng/μl)	1 μl
Primer 1(10 μM )	2 μl
Primer 2(10 μM)	2 μl
2× LongTaqMix	25 μl
dd H2O	补足至50 μl

反应条件

95℃	2 min
95℃	30 sec
55~68℃	30 sec 30 Cycles
72℃	8 min
72℃	5 min

备注
1、建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
2、Long Taq Mix的扩增产物有两种末端：平末端和3'-dA突出末端。要提高克隆效率，建议PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆。
3、模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)

人类基因组DNA	0.1 – 1 μg
λDNA	0.5 – 5 ng
质粒DNA	0.1 – 10 ng
大肠杆菌DNA	10 – 100 ng