半岛bd体育手机客户端 组分

P1031
Taq Plus DNA聚合酶	2.5 U/μl	100 μl
10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus)		1.25 ml
6×Loading Buffer		1 ml
P1032
Taq Plus DNA聚合酶	2.5 U/μl	100 μl
10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus)		1.25 ml
dNTPs(各2.5 mM)		1 ml
6×Loading Buffer		1 ml
P1033
TaqPlus DNA聚合酶	2.5 U/μl	400 μl
10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus)		1.25 ml×2
6×Loading Buffer		1 ml
P1034
Taq Plus DNA聚合酶	2.5 U/μl	400 μl
10×Tpol Buffer(Mg2+ Plus)		1.25 ml×2
dNTPs(各2.5 mM)		1 ml
6×Loading Buffer		1 ml

注： 10×PCR Buffer分为Mg²⁺Plus与Mg²⁺Free两种包装，可方便选择。如没特别说明提供10×PCR Buffer(Mg²⁺Plus)。Mg²⁺Free的10×PCR Buffer提供25 mM MgCl₂。

保存条件
-20℃保存2年。多次冻融不影响生物学活性。

半岛bd体育手机客户端 说明
Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的独特比例混合物。其保真性是Taq DNA聚合酶的4倍，扩增片段的长度可达20 kb(简单模板)。在扩增复杂模板(如GC-rich或重复序列)时，Taq Plus DNA聚合酶的扩增效率高于Taq DNA聚合酶，可用于复杂模板的PCR扩增。扩增产物具有两种末端：平末端与3'-dA。

半岛bd体育手机客户端 特点
复杂模板扩增：如含有GC-rich或重复序列的模板。
保真性好：保真性是Taq DNA聚合酶的4倍。
长片段扩增：扩增片段的长度可达20 kb。

半岛bd体育手机客户端 用途
复杂模板PCR扩增

活性定义
一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制
相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，扩增活性无明显改变。

10×PCR Buffer
500 mM KCl
100 mM Tris-Cl
15 mM MgCl₂
1% Triton-100

酶贮存液
20 mM Tris-HCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
100 mM KCl
0.5 %TW 20
0.5 % NP 40
50 % Glycerol

应用举例
注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
以λ DNA为模板，扩增1 kb片段。

λ DNA(2.5 ng/μl)	1 μl
引物1(10 μM)	2 μl
引物2 (10 μM)	2 μl
10×PCR Buffer	5 μl
dNTPs(2.5 mM/L)	4 μl
Taq Plus DNA聚合酶(2.5 U/μl)	0.5-1 μl
超纯水	补足至50 μl

PCR反应条件

95℃	3 min
95℃	30 sec
55~68℃	30 sec 30 Cycles
72℃	1 min
72℃	5 min

注意事项
1、Taq Plus DNA聚合酶的扩增产物有两种末端：平末端和3'-dA突出末端。要提高克隆效率，建议PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆。
2、建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
3、模板DNA推荐用量(50 μl PCR体系)

人类基因组DNA	0.1 – 1 μg
λDNA	0.5 – 5 ng
质粒DNA	0.1 – 10 ng
大肠杆菌DNA	10 – 100 ng

Q&A
问：Taq Plus DNA聚合酶可扩增多长片段？
答：对于简单模板，可扩增20 kb以下片段。如扩增长片段有困难，建议选择Long Taq Mix。

问：TaqPlus DNA聚合酶的扩增产物有几种末端？
答：有两种末端，平末端和3'-dA突出末端，以平末端产物为主。这是由于Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的特定比例混合物。要提高TA
克隆效率，建议对PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆