10000×Sybr Green II核酸染料
半岛bd体育手机客户端 介绍
10000×Sybr Green II核酸染料 SYBR Green II主要用于RNA和单链DNA电泳。是EB和替代品,无致癌性,超敏感性。用作常规电泳时,须将商品化的核酸MARKER作一定倍数的稀释(1/5-1/10),这样才能得到比较理想结果。 半岛bd体育手机客户端 特点: ● 无毒性:属花箐类染料,容易生物降解,无致癌毒性。 ● 灵敏度高:至少可检出20pg ssDNA或RNA,高于EB染色法25~100倍。 ● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 ● 操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。 ● 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯 酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等;可用于 ssDNA 或 RNA 染色。 ● 使用方便:对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、反转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。 ● 经济:价格比银染便宜。
使用方法: 1.胶染法(用法同EB)(推荐方法) (1) 熔胶后,冷却胶至50℃左右,加入Sybr Green II 核酸染料。每100mL胶中加入3~5μL Sybr Green II 10,000× 储液,以此比例类推。 (2) 按照常规方法进行电泳。 注意事项: (1) 此方法染色可以准确确定核酸片段分子量,染料用量相对较少。1mL染料大约可以做300块 100mL的胶。 (2) 由于Sybr Green II热稳定性较差,不能在热的胶溶液中直接添加,需要等待溶液冷却至50℃左右才能添加。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。 2.泡染法 (1) 按照常规方法进行电泳。 (2) 用pH 7.0~8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000﹕1的比例稀释Sybr Green II 10,000× 储液,混匀,制成1× 染色液。 (3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的1× 染色液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10~30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的1× 染色液轻轻地倒在胶板上,让其均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。 注:用泡染法染色时,可以精确确定核酸片段分子量。但染料用量较多。 相关半岛bd体育手机客户端 : 20ⅹSybr Green I荧光染料 120.00/100ul
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