产品编号：IAC322

原理

叶酸免疫亲和柱能够特异性的纯化样品中的叶酸＋�/span>将样品与提取液混合、提取、过滤，然后将滤液通过免疫亲和柱。此时，叶酸物质键合在亲和柱中的抗体上。用蒸馏水将免疫亲合柱上的杂质除去。用洗脱液通过分离柱，将叶酸从抗体上分离下来。后，将洗脱液注入HPLC或LC-MS进行测定、�/span>

储存条件

该亲和柱保存�?-8 °C条件下，不能冷冻，保质期�?8个月。建议在室温�?8-30°C）下使用、�/span>

实验溶液制备

pH7.4 PBS溶液９�/span>8.0克NaCl + 2.90克Na2HPO4 12H2O + 0.24 � KH2PO4 + 0.2克KCl �?90mL纯水溶解，加纯水�?升、�/span>

10%抗坏血酸钠９�/span>称取10g L-抗坏血酸钠100mL容量瓶中，加水溶解混匀、�/span>

洗脱液（30%乙腈+0.2%丈�span style="padding: 0px; max-height: 100%; line-height: 28px; color: red; box-sizing: border-box; word-break: break-all; max-width: 100%; margin: 0px !important; width: auto !important; height: auto !important;">fu YI 酷�/span>（� 准确量取30mL乙腈加入�?00mL容量瓶中，然后再加入0.2mL 丈�span style="padding: 0px; max-height: 100%; line-height: 28px; color: red; box-sizing: border-box; word-break: break-all; max-width: 100%; margin: 0px !important; width: auto !important; height: auto !important;">fu YI 酷�/span>，后用纯水定容至100mL、�/strong>

所需其他试剂９�/span>胰酶（sigma P1750（�/span>

液相色谱条件

色谱柱： Agilent-C18,4.6×150mm�?um（�/span>

流动相：0.1%丈�span style="padding: 0px; max-height: 100%; line-height: 28px; color: red; box-sizing: border-box; word-break: break-all; max-width: 100%; margin: 0px !important; width: auto !important; height: auto !important;">fu YI 酷�/span>：乙腇�85:15（v/v（�/p>

流速：0.5 mL/min

检测器：紫外检测器�?80nm

进样体积�?0uL

科乐福叶酸免疫亲和柱

分析步骤

1�?nbsp;样品提取及稀釉�/span>９�/span>

婴儿配方食品、婴儿即食食品、牛奶、奶粉、谷物、能量棒等样品的操作步骤９�/span>称取1-10g样品（根据需要的检测范围确定称量多少），置亍�/span>250 mL锥形瓶中。将50mLpH7.4 PBS溶液加入�?/span>锥形瓵�/span>中，混匀。加�?/span>4g胰酶，摇床震�?0分钟、�/span>加入6mL 10%抗坏血酸钠，摇床震�?分钟、�/span>将锥形瓶置于37℃的水浴摇床震荡2 h。然后将锥形瓶置�?00℃的水浴中静�?0min。取出锥形瓶冷却至室温；�?/span>pH7.4 PBS溶液定容臲�/span>100mL，摇匀。将提取涱�/span>4000 RPM离心10 min。准确移取吸取上层液10 mL＋�/span>备用、�/span>

2�?nbsp;样品的净匕�/span>

叶酸免疫亲和柱的柱容�?吸附叶酸)丹�/span>450ng，当样品中叶酸超过测定范围时，请适当减小上柱体积，使其在检测范围内，计算出准确含量、�/span>

食品中folic acid 叶酸免疫亲和� IAC-SEP