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聚焦3.15,海能在行动——瘦肉精死灰复燃
2021.03.16 点击922次

1 前言

一年一度的3.15晚会如期而至,平时有太多的消费隐患藏匿在我们的生活中,每个人都是一名消费者,因此消费者权益晚会,总会受到很多人的关注。

本次晚会以“提振消费 从心开始”为主题。其中有关食品安全“瘦肉精——‘硬羊’背后的秘密”的问题被点名,海能技术对此食品安全问题及时做出应对,为消费者提供全面的检测方案,希望可以为大家提供一定的参考。

“一样的羊不一样的养”,有的羊可以一只多卖五六十块钱,到底是怎样做到的呢?

记者在调查时发现,不少地方的养殖户为了利益不惜铤而走险,依然在偷偷使用违禁药物——瘦肉精!

我国虽然于2000年提出禁止使用“瘦肉精”类药物,但在畜牧业生产中“瘦肉精”的使用仍屡禁不止。

近年来,因食用被“瘦肉精”污染的食物导致中毒事件屡有发生,且后果极其严重,引起了高度重视。

虽然许多国家都禁止在食源性动物的生产中使用盐酸克伦特luo(瘦肉精)。但记者在现场偷偷带回的白色粉末以及饲料,在经过瘦肉精快速检测条检测后,结果均为阳性。

肉类中的瘦肉精该如何使用高效液相色谱仪检测出来呢?海能技术悟空团队快马加鞭,为您准备了一份完整的检测方案。

实验名称:动物性食品中克伦特luo的测定-高效液相色谱法

2 半岛游戏平台官网入口网址 与试剂

2.1半岛游戏平台官网入口网址

高效液相色谱仪 、水浴超声清洗器、磨口玻璃离心管、酸度计、离心机、振荡器、旋转蒸发器、涡旋式混合器、针筒式微孔过滤膜(0.45μm)、 匀浆器 、N2-蒸发器。

2.2试剂

克伦特luo,纯度≥99.5%、磷酸二氢钠、氢氧化钠、氯化钠、高氯酸、浓氨水、异丙醇、乙酸乙酯、甲醇:HPLC级、乙醇、高氯酸溶液(0.1mol/L)、氢氧化钠溶液(1mol/L)、磷酸二氢钠缓冲液(0.1mol/L,pH=6.0)、异丙醇+乙酸乙酯(40+60)、乙醇+浓氨水(98+2)、甲醇+水(45+55)。

克伦特luo标准溶液的配制:准确称取克伦特luo标准品用甲醇配成浓度为250mg/L的标准储备液,贮于冰箱中;使用时用甲醇稀释成0.5mg/L的克伦特luo标准使用液,进一步用甲醇+水(45+55)适当稀释。

弱阳离子交换柱(LC-WCX)(3mL)。

3 实验方法

3.1提取

3.1.1肌肉、肝脏、肾脏试样

称取肌肉、肝脏或肾脏试样10g(精确到0.01g),用20mL 0.1mol/L高氯酸溶液匀浆,置于磨口玻璃离心管中;然后置于超声波清洗器中超声20min,取出置于80℃水浴中加热30min。取出冷却后离心(4500r/min)15min。倾出上清液,沉淀用5mL 0.1mol/L高氯酸溶液洗涤,再离心,将两次的上清液合并。用1mol/L氢氧化钠溶液调pH值至9.5±0.1,若有沉淀产生,再离心(4500r/min)10min,将上清液转移至磨口玻璃离心管中,加入8g氯化钠,混匀,加入25mL异丙醇+乙酸乙酯(40+60),置于振荡器上振荡提取20min。提取完毕,放置5min(若有乳化层稍离心一下)。用吸管小心将上层有机相移至旋转蒸发瓶中,用20mL异丙醇+乙酸乙酯(40+60)再重复萃取一次,合并有机相,于60℃在旋转蒸发器上浓缩至近干。用1mL 0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH6.0)充分溶解残留物,经针筒式微孔过滤膜过滤,洗涤三次后完全转移至5mL玻璃离心管中,并用0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH6.0)定容至刻度。

3.1.2尿液试样

用移液管量取尿液5mL,加入20mL 0.1mol/L高氯酸溶液,超声20min混匀,置于80℃水浴中加热30min。以下按3.1.1从“用1mol/L氢氧化钠溶液调pH值至9.5±0.1”起开始操作。

3.1.3血液试样

将血液于4500r/min离心,用移液管量取上层血清1mL置于5mL玻璃离心管中,加入2mL 0.1mol/L高氯酸溶液,混匀,置于超声清洗器中超声20min,取出置于80℃水浴中加热30min。取出冷却后离心(4500r/min)15min。倾出上清液,沉淀用1mL 0.1mol/L高氯酸溶液洗涤,离心(4500r/min)10min,合并上清液,再重复一遍洗涤步骤,合并上清液。向上清液中加入约1g氯化钠,加入2mL异丙醇+乙酸乙酯(40+60),在涡旋式混合器上振荡萃取5min,放置5min(若有乳化层稍离心一下),小心移出有机相于5mL玻璃离心管中,按以上萃取步骤重复萃取两次,合并有机相。将有机相在N2-浓缩器上吹干。用1mL 0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH6.0)充分溶解残留物,经筒式微孔过滤膜过滤完全转移至5mL玻璃离心管中,并用0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH6.0)定容至刻度。

3.2净化

依次用10mL乙醇、3mL水、3mL 0.1mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH6.0)、3mL水冲洗弱阳离子交换柱,取适量3.1.1、3.1.2、3.1.3的提取液至弱阳离子交换柱上,弃去流出液,分别用4mL水和4mL乙醇冲洗柱子,弃去流出液,用6mL乙醇+浓氨水(98+2)冲洗柱子,收集流出液。将流出液在N2-蒸发器上浓缩至干。

3.3试样测定前的准备

于净化、吹干的试样残渣中加入100μL~500μL流动相,在涡旋式混合器上充分振摇,使残渣溶解,液体浑浊时用0.45μm的针筒式微孔过滤膜过滤,上清液待进行液相色谱测定。

3.4色谱参考条件

半岛游戏平台官网入口网址 : 高效液相色谱仪:K2025P2二元高压输液泵、K2025AS自动进样器、K2025CO柱温箱、K2025UVD紫外-可见光检测器、Wookinglab色谱工作站;

色谱柱:BDS或ODS柱,250mmx4.6mm,5μm;

流动相:甲醇+水(45+55);

流速:1mL/min;

进样量:20μL~50μL;

检测波长:244nm;

柱温:25℃。

3.5测试

吸取20μL~50μL标准校正溶液及试样液注入液相色谱仪,以保留时间定性,用外标法单点或多点校准法定量。

参考文献

[1] GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特luo残留量的测定 第二法 高效液相色谱法(HPLC)

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