1、根据实验需求选择合适的孔径

孔径通常由您的应用或使用目的来决定。支原体可以用0.1μm孔过滤器去除。大多数培养基、缓冲溶液、生物液和气体的常规实验室除菌通常采用0.22μm孔过滤器完成。溶液和溶剂的澄清和预过滤最好用0.45μm或孔径的过滤膜操作。

Tip(当试图控制支原体时，可同时加入环丙沙星过滤盐酸盐(HCl)。它是一种4-氟喹诺酮类抗生素常用来控制支原体受感染的污染细胞系)

请参看下表，来为您的应用选择匹配的推荐膜和孔径。

应用	孔径um
去除支原体	0.1
水性溶液的除菌和超净处理、溶剂的超净处理(HPLC)	0.22
水性溶液的澄清、溶剂的澄清(HPLC)	0.45

2、为您的应用选择最佳滤膜材质

您的过滤器装置必须和样品的化学性质完全相容。一些过滤膜含有可能对一些应用造成干扰的无毒的润湿剂。另一些滤膜可能结合蛋白质或其它大分子，从而导致过滤器过早堵塞或高价值样品的损失。因此，了解样品性质以及滤膜对与之接触的溶液的潜在影响是非常重要的。

	醋酸纤维素CA	尼龙NYLON	聚醚砜PES	混合纤维素MCE	特氟龙PTFE
蛋白结合	非常低	低至中	非常低	低	不适用
DNA结合	非常低	非常低	非常低	低	不适用
耐化学性	低	中至高	低	非常高	非常高

聚醚砜(PES)

滤膜强烈推荐用于过滤细胞培养基。PES结合蛋白质的能力和可提取物含量都非常低。PES膜的流速也高于纤维素或尼龙膜。

醋酸纤维素酯膜(CA)

滤膜对多数大分子的结合亲和力非常低，尤其适用于要求低蛋白结合作用的应用，例如含血清培养基的过滤。

尼龙膜(聚酰胺NYLON)

本质上是亲水性的，推荐用于对可提取物含量要求非常低的应用，因为它们不含任何润湿剂、清洁剂或表面活性剂。尼龙膜的耐化学性能较强，适于过滤腐蚀性较大的溶液，例如酒精和DMSO。

特氟龙?(PEFE，聚四氟乙烯)

膜本质上并且永远是疏水性的，适于过滤气体，包括增湿的空气。特氟龙膜的耐化学性极佳，这使其非常适于过滤其它滤膜不能过滤的溶剂或其它腐蚀性化学品。由于其疏水性，特氟龙膜在过滤水性溶液以前必须用溶剂(例如乙醇)预先润湿。

3、选择合适滤膜直径以优化流速和膜通量

选择一个具有充足的容量或通量，从而能够快速高效地处理所有样品的过滤器。这主要取决于膜的有效表面积。

过滤膜直径	有效过滤面积(cm2)	预计通量(ml)
50mm	19.6	150-750
70mm	39.5	500-2500
91mm	65	1000-5000

较低值为粘性或含颗粒溶液的典型值；较高值为缓冲液或无血清培养基的典型值

TIP

1、离心将去除大部分悬浮颗粒并减少过滤器堵塞，改善流速和吞吐量。也可以预过滤减少颗粒负荷和过早的膜堵塞。

2、液体温度的影响

对于大多数应用，在室温下过滤溶液没有问题。通常增加溶液的温度会增加流速。例如，将细胞培养基的温度从4℃增加至37℃会使流速加倍。这最可能是由于培养基粘度的下降。但是，在一些情况下，较低温度下过滤会增加总通量，对血清等含蛋白质和脂肪的溶液尤其如此。

3、压差的影响

对于真空过滤，建议采用400mm Hg(7.73 psig)的压差(真空)。再增加压差只会使流速提高一点，但是可能导致过量泡沫的形成，因为滤出液中的气体会从溶液中逸出产生气泡。在过滤加入碳酸氢盐缓冲液的细胞培养基时这个问题尤其突出。在较高的压差下，培养基中溶解的二氧化碳将很快逸出，导致pH值上升，如果培养基中含有血清蛋白则形成过量的泡沫。