半岛bd体育手机客户端 介绍
甘油三酯(Triglyceride，TG)又称三酰甘油或三油酸甘油酯，是三分子长链脂肪酸和一分子甘油形成的脂肪分子，是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成，目前检测甘油三脂的常用方法有酶法和化学法，酶法测定具有简便、快捷、微量且试剂稳定等优点，适用于手工和自动化测定，化学法是使用异丙醇等有机溶剂从血清中抽提出甘油三酯，再经皂化、氧化，由显色反应进行测定，目前最常用的化学法是乙酰丙酮比色法。 甘油三酯(TG)检测试剂盒(乙酰丙酮微板法)其检测原理是组织匀浆液或血清中的甘油三脂被异丙醇提取出来，经氧化铝吸附磷脂等干扰因素，再经皂化后释放出甘油，后者被氧化剂氧化生成甲醛，甲醛与乙酰丙酮在铵离子存在下生成黄色的 3,5-二乙酰-1,4-双氢二甲基吡啶(Hantgsch反应)，用酶标仪在 420nm处进行比色测定，与相同处理的标准管对比计算其含量，用于人或动物的血清、血浆、脑脊液等样本中的甘油三脂含量定量测定，本方法所用试剂比较稳定，室温下即可保存半年以上，检测较灵敏，在 0.04～0.8mg/ml(0.045～0.904mmol/L)之间有良好的线性关系。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。 半岛bd体育手机客户端 组成：
自备材料： 1、生理盐水、异丙醇 2、离心机、天平 3、离心管、小试管 4、恒温箱 5、酶标仪、96孔板 操作步骤(仅供参考)： 1、准备样品： ①血清样品，取 0.1ml血清加入有盖的离心管，向管底吹入 2.4ml异丙醇。 ②组织样品，准确称取适量组织样品(质量为 m)，按质量(g)：生理盐水 (ml)=1：4的比例，加入生理盐水，冰浴条件下手动或机械匀浆，获取匀浆液(体积为 VT)，取 0.2ml匀浆液加入有盖的离心管，向管底吹入 2.3ml异丙醇。 ③混合后置于 60℃水浴 2min，然后加入 0.5g氧化铝，加盖，快速振摇 2min，3000g离心 5min，取上清液(即抽提液)，待用。 2、配制 Glycerol标准工作液：按 Glycerol标准(4mg/ml)：蛋白沉淀液=1：49的比例，配制合适量的 Glycerol标准工作液，其浓度为 0.08mg/ml。 3、TG加样：按照下表设置空白孔、对照孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡；如果样品中的 TG含量过高，可减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
4、TG测定：取出 96孔板，冰水冷却，用酶标仪测定 420nm处空白孔、标准孔和测定孔的吸光度(A空白、A标准、A测定)。 计算： TG(mg/100ml)=(A测定-A空白)/( A标准-A空白)×0.08×(0.1+2.4)/0.05×100/0.1=(A测定-A空白)/( A标准-A空白)×4000 100g组织中含有的甘油三酯的量： TG(mg/100g)=(A测定-A空白)/( A标准-A空白)×0.08×(0.2+2.3)/0.05×VT/0.2×100/m=(A测定-A空白)/( A标准-A空白)×2000×VT/m 样品中甘油三酯的浓度：TG(mg/ml)=(A测定-A空白)/( A标准-A空白)×0.08 式中：A测定=测定孔的吸光度 A标准=标准孔的吸光度 VT=一定质量组织的匀浆液总体积(ml) m=实际取用的组织质量(g) TG浓度换算：1mg/ml=1.13mmol/L
参考范围： 血清 TG正常范围：0.55～1.70mmol/L； 注意事项： 1、本法可直接用于检测脑脊液中的 TG含量和尿液中的 TG含量。 2、待测样品如不能及时测定，应置于 2～8℃保存，3天内稳定。 3、该方法的线性范围是 0.04～0.8mg/ml，R2=0.989，0.6mg/ml以内比较准确，超过0.8mg/ml，OD值不稳定，变化较大，值偏低，因此样品浓度超出上述范围应做稀释后再次定量，结果乘以稀释倍数。 4、显色后吸光度会随时间发生变化，故应及时比色，当标本过多时，可置冰箱中逐一比色。 5、皂化、氧化、显色时间和温度对显色结果及最终的吸光度均会造成影响，所以每批次测定都应同时做标准对照。 6、做血浆标本时，应注意抗凝剂的影响，通常使用 EDTA.2K做抗凝胶，浓度为 1mg/ml。 有效期：12个月有效；常温运输，4℃保存。 |
相关半岛bd体育手机客户端
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
