S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类，在H₂O₂清除系统中具有重要作用。

H₂O₂在240nm下有特征吸收峰，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化，即可反应S-CAT活性的高低。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

半岛bd体育手机客户端 组成：

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体0.3ml×1瓶	4℃
试剂二	粉剂×1支	4℃
试剂三	液体3ml×1瓶	4℃

溶液的配制：

1.试剂一：液体置于试剂瓶内EP管中。临用前取0.1ml试剂一加入9.9ml蒸馏水稀释待用或者按比例配制。用不完的试剂4℃保存；

2.试剂二：临用前加入1ml蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵、蒸馏水、30～50目筛。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30～50目筛。二、测定步骤

1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至240nm，蒸馏水调零。

2.加样表：

试剂名称	测定管	无基质管	无土管
风干土样(g)	0.03	0.03
试剂一(μL)	260		260
双蒸水(μL)		260
25℃振荡培养 20min
试剂二(μL)	10	10	10
混匀 8000g，25℃离心 5min，取全部上清
试剂三(μL)	30	30	30

混匀，取 200μL至微量石英比色皿或 96孔板中，240nm处记录各管吸光值 A。(每个测定管要设一个无基质管，无土管只要做 1-2管)

三、S-CAT活性计算

A.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

单位的定义：每天每 g风干土样催化 1mmolH₂O₂降解定义为一个酶活力单位。

计算公式：S-CAT(U/g土样)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷(ε×d)×10³]÷W÷T=16.5×(A无土管-A测定管+A无基质管)

V反总：反应体系总体积，3×10^-4L；ε：过氧化氢摩尔消光系数，43.6L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；T：反应时间，20min=1/72d；W：样本质量，0.03g。

B.用 96孔板测定的计算公式如下

单位的定义：每天每 g风干土样催化 1mmolH₂O₂降解定义为一个酶活力单位。

计算公式：S-CAT(U/g土样)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷(ε×d)×10³]÷W÷T=27.5×(A无土管-A测定管+A无基质管)

V反总：反应体系总体积，3×10^-4L；ε：过氧化氢摩尔消光系数，43.6L/mol/cm；d：96孔板光径，0.6cm；T：反应时间，20min=1/72d；W：样本质量，0.03g。

注意事项:

如果吸取的上清仍有部分浑浊，可以在加入试剂三后统一再次进行离心。

相关发表文献：

Hou Q, Wang W, Yang Y, et al. RhizospHere microbial diversity and community dynamics during potato cultivation[J]. European Journal of Soil Biology, 2020, 98: 103176.

参考文献：

[1]杨兰芳,曾巧,李海波, et al.紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性[J].土壤通报, 2011, 42(1):207-210. [2] Johansson L H, Borg L A H. A spectropHotometric method for determination of catalase activity in small tissue samples[J]. Analytical biochemistry, 1988, 174(1): 331-336.