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植物组织果糖含量检测试剂盒(可见分光光度法)
植物组织果糖含量检测试剂盒(可见分光光度法)图片
包装: 50管/48样
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半岛bd体育手机客户端 介绍

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与

葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。在酸性条件下果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。

半岛bd体育手机客户端 内容:

提取液:液体100ml×1瓶,4℃保存;

试剂一:5mg/ml标准液1ml×1支,4℃保存;

试剂二:液体40ml×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体10ml×1瓶, 4℃保存;

试剂四:粉剂0.5g×1瓶,常温保存。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、蒸馏水。

操作步骤:

一、果糖提取:称取约0.1g样本,常温研碎;加入1ml提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于80℃水浴锅中 10min(盖紧,以防止水分散失),振荡3~5次,冷却后,4000g,常温离心10min,取上清;加入少量(约 2mg)试剂四,80℃脱色 30min(盖紧,以防止水分散失);再加入1ml提取液,4000g,常温离心10min,取上清液测定。

二、测定操作表(在1.5ml EP管中依次加入下列试剂):

1、可见分光光度计预热30min以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。

2、样本测定

试剂名称(uL) 空白管 标准管 测定管
样本

100
试剂一
100
蒸馏水 100
-
试剂二 700 700 700
试剂三 200 200 200

混匀,80℃水浴内反应10min(盖紧,以防止水分散失),冷却后测定480nm处光吸收值,记为A空白管、A标准管、A测定管,并计算△A测定=A测定管-A空白管、△A标准=A标准管-A空白管。

果糖含量计算:

1、按蛋白浓度计算

果糖含量(mg/mg prot)= C标×△A测定÷△A标准×V样总÷(Cpr×V样总)=5×△A测定÷△A标准÷Cpr

2、按样本鲜重计算

果糖含量(mg/g鲜重)= C标×△A测定÷△A标准×V样总÷W =10×△A测定÷△A标准÷W

C标:标准品浓度,5mg/ml;W:样品鲜重,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/ml;V样总:提取液体积,2ml。

注:

如果测定管的OD值大于0.6,请用提取液稀释样品。

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