土壤铵态氮是土壤速效氮的重要组成部分，可以被植物直接吸收利用。铵态氮指标对农业生产具有极其重要的作用。

在强碱介质中，土壤中的铵态氮与次氯酸盐和苯酚作用，生成靛酚蓝染料，在630nm处有特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。

技术指标：

最低检出限：0.1314μg/ml

范围：0.15625-18μg/ml

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

半岛bd体育手机客户端 组成：

试剂名称	规格	保存条件
提取液	液体100 ml×1瓶	4℃
试剂一A	液体1ml×1支	4℃
试剂一B	液体4ml×1瓶	4℃
试剂二	液体2.5ml×1瓶	4℃
标准品	液体1ml×1支	4℃

溶液的配制：

1.试剂一：临用前将试剂一A加入试剂一B中混匀备用，或按比例现用现配；

2.标准品：100μg/ml NH₄-N标准液。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品：

可见分光光度计/酶标仪、天平、离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、振荡器、30～50目筛、研钵、恒温水浴锅。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

按照风干土样质量(g)：提取液体积(ml)为1：5～10的比例(建议称取约0.1g风干土样，加入1ml提取液)，振荡提取1h，10000g，25℃离心10min，取上清液待测。

二、测定步骤

1.可见分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至630nm，蒸馏水调零。

2.将100μg/ml氮标准液用蒸馏水稀释至2.5μg/ml备用。

3.加样表：

试剂名称(μL)	空白管	标准管	测定管
样本	-	-	120
蒸馏水	120	-	-
标准品	-	120	-
试剂一	24	24	24
试剂二	18	18	18
充分混匀，于室温25℃放置30min
蒸馏水	138	138	138
充分混匀后吸取200μL于微量玻璃比色皿或96孔板中测定630nm处吸光值，记为A空白管、A标准管、A测定管。计算ΔA标准=A标准管-A空白管，ΔA测定=A测定管-A空白管。

三、计算公式

NH₄-N(μg/g土样)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W

C标准液：标准液浓度，2.5μg/ml；V提取：提取液体积，1ml；W：样本质量，g。

注意事项:

1.试剂一避光 4℃保存，变色后不能使用。

2.如果样本吸光值大于 1.4，建议将样本用提取液稀释后进行测定。

实验实例：

1.取 0.1g三叶草土加入 1ml提取液震荡提取 1h离心，取上清之后按照测定步骤操作，使用 96孔板测得计算 ΔA测定管=A测定管-A空白管=0.144-0.062=0.082，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.326-0.062=0.264，按样本质量计算含量得：

NH₄-N(μg/g土样)=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2.5×0.082÷0.264÷0.1=7.77 μg/g土样。

2.取 0.1g林土加入 1ml提取液震荡提取 1h离心，取上清之后按照测定步骤操作，使用 96孔板测得计算ΔA测定管=A测定管-A空白管=0.131-0.062=0.069，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.326-0.062=0.264，按样本质量计算含量得：

NH₄-N(μg/g土样)=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2.5×0.069÷0.264÷0.1=6.53 μg/g土样。