S-β-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

S-β-GC能够催化对-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，产物略显黄色，在400nm有特征光吸收。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

半岛bd体育手机客户端 组成：

试剂名称	规格	保存条件
试剂一	液体5ml×1瓶(自备)	4℃
试剂二	粉剂×1瓶	-20℃
试剂三	液体30ml×1瓶	4℃
试剂四	液体20ml×1瓶	4℃
标准液	液体1ml×1支	4℃

溶液的配制：

1.试剂一：自备甲苯；

2.试剂二：临用前每瓶加入13ml蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；

3.标准液：5mmol/L的对硝基苯酚溶液；

4.标准液的准备：取100μL标准液，加入到400μL试剂三中，得到1mmol/L标准液，再用蒸馏水十倍稀释到100μmol/L。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温培养箱、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、冰、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

操作步骤：

一、样品处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30～50目筛。

二、测定步骤

1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

2.用蒸馏水倍比稀释：50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L做标准液。

3.加样表：

试剂名称	测定管	对照管	标准管	空白管
风干土样(g)	0.02	0.02	-	-
试剂一(μL)	10	10	-	-
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置15min
试剂二(μL)	130	-	-	-
试剂三(μL)	160	160	-	-
混匀，37℃水浴1h后，立即沸水浴煮沸5min(盖紧，防止水分散失)，流水冷却
试剂二(μL)	-	130	-	-
充分混匀，10000g常温离心10min，取上清液
上清液(μL)	70	70	-
标准液(μL)	-	-	70
蒸馏水(μL)	-	-	-	70
试剂四(μL)	130	130	130	130

充分混匀，室温静置2min后，测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。(每个测定管设一个对照管)。

三、S-β-GC酶活的计算

1.标准曲线建立：

根据标准管的浓度(y)和吸光度ΔA=A标准管-A空白管(x)，建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA(x)带入公式计算样本浓度(μmol/L)。

2.S-β-GC酶活的计算：

单位的定义：每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC酶活(U/g土样)=y×V反总÷W÷T=0.36×y

T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：3×10^-4L；W：样本质量，0.02g。