注意:正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

硅元素是一种十分重要的植物营养元素，土壤中有效硅含量影响着植物的光合作用、呼吸作用以及对逆境的抗性。

测定原理

硅酸根与钼酸铵在弱酸条件下生成硅钼酸，可被还原剂还原成硅钼蓝，在 700nm有特征吸收峰。

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天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。

试剂组成和配制

提取液:液体 105ml×1瓶，4℃保存。

试剂一:液体 4ml×1瓶，4℃保存。

试剂二:液体 4ml×1瓶，4℃保存。

试剂三:液体 4ml×1瓶，4℃保存。

试剂四:粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入 4ml试剂四溶剂充分溶解。

试剂四溶剂:液体 4ml×1瓶，4℃保存。

样本处理

新鲜土样风干，过 20目筛，按照土壤质量(g):提取液体积(ml)为 1:5的比例(建议称取约 0.2g土样，加入 1ml提取液)，振荡提取 1h，10000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。

测定操作表

	空白管	测定管
样本(μL)		40
提取液(μL)	40
试剂一(μL)	40	40
混匀，35℃，15min
试剂二(μL)	40	40
混匀，25℃，10min
试剂三(μL)	40	40
试剂四(μL)	40	40
充分混匀，25℃静置 30min
于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定 700nm处吸光值 A，分别记为 A空白管和 A测定管，△A=A测定管-A空白管

计算公式

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0933x -0.0523，R²= 0.9992

有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷ 0.0933×V反总÷(W×V样÷V样总)=53.6×(△A+0.0523)÷W

V反总:反应总体积，0.2ml；V样:反应体系中加入样本体积，0.04ml；V样总:加入提取液体积，1ml，W:样本质量，g

b.用 96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.0467x -0.0523，R²= 0.9992

有效硅含量(mg/kg)=(△A+0.0523)÷ 0.0467×V反总÷(W×V样÷V样总)=107.2×(△A+0.0523)÷W

V反总:反应总体积，0.2ml；V样:反应体系中加入样本体积，0.04ml；V样总:加入提取液体积，1ml，W:样本质量，g