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土壤硝酸还原酶(S-NR)测试盒(可见分光光度法)
土壤硝酸还原酶(S-NR)测试盒(可见分光光度法)图片
货号: SNR-2-Y
包装: 50管/24样
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货号: SNR-2-Y
半岛bd体育手机客户端 介绍

正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

S-NR催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐,是土壤硝态氮还原的关键酶。研究 S-NR的活性对合理施肥,降低氮素的损失具有重要意义。

测定原理

S-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD++H2O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对–氨基苯磺酸及 α-萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在 540 nm有最大吸收峰,可用分光光度法测定。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一:液体 10ml×1瓶,-20℃保存。

试剂二:液体 8ml×1瓶,-20℃保存。

试剂三:液体 15ml×1瓶,4℃保存(如出现结晶析出,60℃-90℃水浴溶解后使用)。

试剂四:液体 15ml×1瓶,4℃保存。

试剂五:标准品储备液 1ml,-20℃保存。

0.1μmol/ml标准液的配制:用时将试剂五稀释 100倍,即取 0.1ml加蒸馏水定容至 10ml。

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37度烘箱风干,过 30~50目筛。

测定操作表

试剂名称 1ml带盖离心管
试剂名称 测定管 对照管 标准管 空白管
风干土样(g) 0.1 0.1

0.1μmol/ml标准液(μL)

100
蒸馏水(μL)
375
475
试剂一(μL) 375
375
试剂二(μL) 125 125 125 125

混匀后,盖盖后 37℃水浴 24h,8000g25℃离心 10min,取上清液

上清液(μL) 400 400 400 400
试剂三(μL) 250 250 250 250
试剂四(μL) 250 250 250 250

混匀,25℃显色 20min后,4000g,25℃离心 10min,用蒸馏水调零,540nm下读取各管吸光值。标准管和空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。

注意点:

务必先做2个样本的预测定,少部分土壤由于样本特殊性可能出现测定管小于对照管,请及时与我司技术支持联系,以获得针对样本特殊性的调整测定方法。

S-NR活性计算:

单位的定义:每天每 g土样中产生 1μmol NO2的量为一个 S-NR活力单位。

S-NR(μmol/d/g土样)=C标准×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V反总÷W÷T=0.5×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)

C标准管:标准管浓度,0.1μmol/ml;V反总:反应体系总体积,0.5ml;T:反应时间,24h; W:样本质量,0.1g。

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