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注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 测定意义 速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分,包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷,土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。测定原理用弱碱性提取碱溶性磷和吸附态磷,用钼锑抗比色法测定。 自备实验用品及半岛游戏平台官网入口网址 天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪。 试剂组成和配制 提取液:液体 55mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:液体 6mL×1支,4℃保存。 试剂二:粉剂×1支,4℃避光保存。临用前加 2mL蒸馏水溶解。用不完的试剂 4℃保存。 试剂三:粉剂×3支,4℃避光保存。临用前加 1mL蒸馏水溶解。现配现用。 样本处理 新鲜土样风干,过 30-50目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为 1:20的比例(建议称取约 0.05g土样,加入 1mL提取液),振荡提取 1h,10000g ,25℃离心 10min,取上清液待测。 测定操作表 1、显色液的配制(可测 20个样):取 2mL EP管一支,加入 1320μL试剂一,再加入 200μL试剂二,充分混匀后,再加入 480μL试剂三,充分混匀待用;配好的显色液应为黄色,若变蓝则为磷污染;显色液必须现配现用;若一次性测不了 20个样,可按比例缩小各试剂体积。 2、操作表
计算公式 标准曲线:y = 0.1164x-0.012,R2= 0.9958,x为标准品浓度(mg/L),y为吸光值。 速效磷含量(mg/kg干重)=(△A+0.012)÷ 0.1164×V样÷(W×V样÷V样总)= 8.591×(△A+0.012)÷W V样:加入反应体系中样本体积,0.2mL;V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,约 0.05g 注意事项 1.配好的显色液当天用完,变蓝则不能使用。 2.最低检出限为 0.2μg/mL。 |
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