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生物碱含量测试盒(可见分光光度法)
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货号: SWJ-2-Y
包装: 50管/48样
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半岛bd体育手机客户端 介绍

正式测定前取 2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

生物碱存在于自然界(主要为植物,但有的也存在于动物)中的一类含氮的碱性有机化合物,大多数有复杂的环状结构,氮素多包含在环内,有显著的生物活性,是中草药中重要的有效成分之一。

测定原理:

生物碱与溴甲酚绿指示剂反应,生成绿色化合物,在 416nm处有最大吸收峰。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品:

分光光度计、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、80%乙醇、氯仿和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:液体 10mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体 50mL ×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体 20mL ×1瓶,4℃避光保存;

生物碱的提取:

样本烘干粉碎,过 80目筛。称取约 0.1g样本,加入 0.1mL试剂一,再加入 0.9,mL80%乙醇,充分混匀后转移到 EP管中,超声波提取 60min, 8000 g,25℃离心 10 min,取上清液待测。另取空 EP管,加入 0.1mL试剂一和 0.9,mL80%乙醇,混匀后作为空白液。

测定步骤:

1、分光光度计预热 30min以上,调节波长至 416nm处。

2、操作表:在 EP管中加入如下试剂

试剂名称(μL) 空白管 测定管
样本
150
空白液 150
试剂二 750 750
试剂三 300 300
混匀,室温静置 5min
氯仿
1500 1500

剧烈振荡混匀,室温静置 40min,吸取下层氯仿层 1mL于 1mL玻璃比色皿,416nm处读取吸光值 A,ΔA=A测定-A空白,空白管只要做一管。

生物碱含量计算:

标准条件下测定的回归方程为 y = 3.83x - 0.0005,R2= 0.9942;x为标准品浓度(mg/mL),y为 ΔA。

生物碱含量(mg/g干重)=(ΔA+0.0005)÷3.83×V样总÷W=0.261×(ΔA+0.0005)÷W

V样总:加入提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g。

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