注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

土壤全磷包括有机磷和无机磷，有机质中的有机磷可受土壤微生物的分解，转化为无机磷，可供植物吸收利用，土壤中磷素营养状况影响作物的产量和质量，而土壤的全磷主要来自土母质和施用的肥料，反映了土壤潜在的供磷能力。

测定原理

混合酸高温消解土壤样品，采用钼锑抗比色法测定样品中的磷含量。

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消解仪、消化管、天平、烘箱、100目筛、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液管、浓硫酸、高氯酸。

试剂组成和配制

试剂一：液体 50mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1支，4℃避光保存。临用前加 0.2mL蒸馏水溶解。试剂三：液体 0.4mL×1支，4℃保存。工作液：临用前将试剂二和试剂三充分混匀，加 19.4mL蒸馏水混匀。

样本处理

新鲜土样风干或 50℃烘干，过 100目筛，称 0.5g左右置于消化管中，加 1mL蒸馏水润湿样品，再加 10mL浓硫酸，摇匀后加入高氯酸 0.2mL，轻轻摇匀，同时做两个样品空白管，置于消解仪上，消解参数设置为：100℃，10min；200℃，10min；350℃，20min；400℃，30min。

消解结束后用蒸馏水定容至 100mL，静置后分别取 1mL样品空白及样品消解液，分别加入0.5mL试剂一混匀作为待测样品。

测定操作表

	空白管	测定管
样本(μL)		20
空白消解液(μL)	20
工作液(μL)	180	180
充分混匀，25℃静置 30min
于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定 700nm处吸光值 A，分别记为 A空白管和 A测定管，△A=A测定管-A空白管

注意：空白管只需测定一次。

计算公式

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y = 2.1476x -0.0011，R2 = 0.9983； (x为标准磷浓度，μmol/mL；y为吸光值 A)

全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷2.1476×V总÷W×10^-3×31= 1.443×(△A+0.0011)÷W

V总：加入提取液体积，100mL，W：样本质量，g

b.用 96孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 1.0738x -0.0011，R2 = 0.9983；(x为标准磷浓度，μmol/mL；y为吸光值 A)

全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷1.0738×V总÷W×10^-3×31= 2.887×(△A+0.0011)÷W

V总：加入提取液体积，100mL，W：样本质量，g

注意事项

1.配好的试剂 3天内使用完。

2.最低检出限为 0.25mg/Kg。