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果糖含量测试盒(微量法)
果糖含量测试盒(微量法)图片
货号: GT-1-Y
包装: 100管/96样
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半岛bd体育手机客户端 介绍

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。

测定原理:

果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在 480nm 下有特征吸收峰。

所需的半岛游戏平台官网入口网址 和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、蒸馏水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100ml×1 瓶,4℃保存;

试剂一:1mg/mL 标准液 10mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 25ml×1 瓶,4℃保存;

试剂三:液体 8ml×1 瓶, 4℃保存;

试剂四:粉剂 0.5g×1 瓶,常温保存。

果糖提取:

称取 0.1~0.2g 样本,常温研碎;加入 0.5mL 提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于 80℃水浴锅中 10min(盖紧,以防止水分散失),振荡 3~5 次,冷却后,4000g,25℃ 离心 10min,取上清;加入少量(约 2mg)试剂四,80℃脱色 30min(盖紧,以防止水分散失);再加入 0.5mL 提取液,4000g,25℃离心 10min,取上清液测定。

测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。

2、样本测定,(在 EP 管中依次加入下列试剂):

试剂(μL) 空白管 标准管 测定管
样本

30
试剂一
30
蒸馏水 30

试剂二 210 210 210
试剂三 60 60 60

混匀,95℃水浴反应 30min(盖紧,以防止水分散失),冷却后取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中测定 480nm 处光吸收值,空白管、标准管和测定管分别记为 A1、A2 和 A3。 空白管和标准管只要做一管。

果糖含量计算:

1、果糖含量(mg/mg prot)=(C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1)÷Cpr

此法需要自行测定蛋白浓度。

2、果糖含量(mg/g 鲜重)=(C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= (A3-A1)÷(A2-A1)÷W。

C 标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.03mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

注意:最低检测限为100ng/g鲜重或1ng/mg prot

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