注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

高密度脂蛋白为血清蛋白之一，主要由肝脏合成，运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子， 俗称“血管清道夫”，对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。

测定原理

用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇，利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸，从而把胆固醇酯转化为 FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4- 胆甾烯酮和 H2O2；再利用过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在 500nm 有特征吸收峰。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品

离心机，恒温水浴锅、酶标仪/可见分光光度计、96 孔板/微量石英比色皿、蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃保存。临用前加 5mL 试剂四充分溶解。

试剂四：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。

标准品：液体 1mL×1 支，4℃保存。

样品处理

取血后 3 小时内分离血清，将血清样品与试剂一按照 1:1 的比例充分混匀，25℃静置 15min，2000g 离心 15min，上清置于冰上待测。

测定操作表

	标准管	测定管
标准品(μL)	4
样本(μL)		4
试剂二(μL)	150	150
试剂三(μL)	50	50
混匀，37℃静置 30min，测定 500nm 处吸光值 A。分别记为 A 标准管和 A 测定管

计算公式

HDL-C 含量(mmol/L)= A 测定管÷A 标准管×C 标准管=5×A 测定管÷A 标准管

C 标准管：5mmol/L

注意事项

1. 样本切勿反复冻融，**在取血后 12 小时内完成测定。

2. 配置好的试剂三 4℃保存可半个月。

3. 线性范围为 0.15mmol/L-3.8mmol/L。