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γ-氨基丁酸(GABA)测试盒(微量法)
γ-氨基丁酸(GABA)测试盒(微量法)图片
货号: GABA-1-W
包装: 100管/96样
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货号: GABA-1-W
半岛bd体育手机客户端 介绍

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

γ-氨基丁酸(GABA)是一种天然活性成分,广泛分布于动植物体内。γ-氨基丁酸是中枢神经系统中有效的抑制性神经递质,具有降血压、增进脑活力、营养神经细胞、保持神经安定、 促进生长激素分泌和保肝利肾等作用,目前在医药和保健食品中已有广泛的应用。

测定原理:

苯酚和次氯酸钠与 GABA 反应,产生蓝绿色产物,在 640nm 有最大吸光值。

需自备的半岛游戏平台官网入口网址 和用品:

酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存;

试剂三:液体 8mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。

样品测定的准备:

称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液,充分匀浆,转移至 EP 管,95℃水浴 2h(盖紧,以防止水分散失)。冷却后 8000g ,25℃离心 10min,取上清待测。

测定步骤

EP 管中加入如下试剂

试剂名称(μL) 测定管 空白管
上清 30
提取液
30
试剂一 50 50
试剂二 40 40

混匀,室温静置 5min。

试剂三
60 60

混匀,95℃水浴 10min,冰浴冷却。

试剂四
200 200

混匀,取 200μL 于 96 孔板,测定 640nm 下吸光值 A 测定与 A 空白,ΔA=A 测定-A 空白,空白管只需测一管。

GABA 含量计算:

标准条件下测定回归方程为 y = 0.0265x - 0.0163,R2 = 0.9953;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光值。

1、按照蛋白浓度计算

GABA(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0163)÷0.0265÷Cpr=37.74×(ΔA+0.0163)÷Cpr

2、按样本鲜重计算

GABA 含量(μmol/g 鲜重)=(ΔA+0.0163)÷0.0265÷W=37.74×(ΔA+0.0163)÷W Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。

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