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血清总铁结合能力(TIBC)检测试剂盒
血清总铁结合能力(TIBC)检测试剂盒图片
货号: AK214
包装: 100T/96S
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货号: AK214
半岛bd体育手机客户端 别名: Serum Total Iron Binding Capacity Assay Kit
半岛bd体育手机客户端 介绍

意义:血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力,其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。

原理:Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物,在562nm 处有特征吸收峰。碱性条件下,血清转铁蛋白 可以与 Fe3+结合,剩余未结合的 Fe3+可以被还原成 Fe2+,此时吸光度 A1 与未结合 Fe3+数量正相关; 酸化后,转铁蛋白结合的 Fe3+释放,并且进一步被还原成 Fe2+,此时吸光度 A2 与总 Fe3+数量正相关。A2 减 A1 与 TIBC 浓度呈正比。

检测方法:可见分光光度法

半岛bd体育手机客户端 组成及保存条件:

编号

规格

储存条件

AK214-A

50mL×1 瓶

4℃保存;

AK214-B

5mL×1 瓶

4℃避光保存;

AK214-C

5mL×1 瓶

4℃避光保存;

(临用前根据用量将 A 液和 B 液按 1:1 混合)

AK214-D

15mL×1 瓶

4℃保存;

※ 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

自备用品:

天平、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。

测定步骤:

1. 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 562nm。

2. 在 0.5 mL EP 管中依次加入下列试剂

试剂名称

对照管 (ul)

测定管 (ul)

血清


100

AK214-A

800


AK214-B

100

100

混匀,37℃,10min



AK214-C

100

100

混匀,37℃,5min,对照管调零,1mL 玻璃比色皿测定 562nm 处吸光值 A1, 测完后立即加入 AK214-D

AK214-D

300

300

混匀,37℃,5min,1mL 玻璃比色皿,对照管调零,测定 562nm 处吸光值 A2。

ΔA=A2-A1

注意:对照管只需测定一次。

血清总铁结合力计算公式:

总铁结合能力定义:37℃条件下,每升血清结合Fe3+的 μ mol 数。 标准曲线:y=0.5478x+0.0281,R2=0.9981

总铁结合能力 TIBC (μmol/L) = (ΔA-0.0281)÷0.5478×V 反总÷V 样= 23.731×(ΔA-0.0281)

注: V 反总:反应总体积,1.3mL;V 样:反应中样本体积,0.1mL

注意事项:

1. 吸光值大于 0.8,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。

2. AK214-B、AK214-C 有一定的毒性,操作时请做好防护措施。

3. 检测限为 4.78μmol/L。

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