意义：蔗糖不仅是重要的光合产物，也是植物体内运输的主要物质，还是碳水化合物的贮存形式之一。

蔗糖磷酸合成酶 (Sucrose phosphate synthase，SPS) (EC 2.4.1.14) 以果糖-6-磷酸为受体，形成的蔗糖 磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。

原理：蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖磷酸与间苯二酚反应可呈现颜色变化， 在 480nm 下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比。

检测方法：微量法

半岛bd体育手机客户端 组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
提取液 ES14	100mL×1 瓶	4℃保存；
AK235-A	2.5mL×1 瓶	-20℃保存；
AK235-B	10mL×1 瓶	4℃保存；
AK235-C	2mL×1 瓶	4℃保存；
AK235-D	25mL×1 瓶	4℃保存；
AK235-E	6mL×1 瓶	4℃保存；

※ 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

自备用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰。

粗酶提取：

按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为 1:5～10 的比例(建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液ES14)，进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1. 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 480nm，蒸馏水调零。

2. 在 EP 管中依次加入下列试剂

试剂名称	测定管 (ul)	对照管 (ul)	标准管 (ul)	空白管 (ul)
上清	10	10
蒸馏水		45	45	55
AK235-B			10
AK235-A	45
混匀，25℃准确水浴10min
AK235-C	15	15	15	15
沸水浴中煮沸 10min 左右(盖紧，以防止水分散失)，冷却
AK235-D	210	210	210	210
AK235-E	60	60	60	60
混匀，沸水浴 30min，冷却后，取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中，480nm 下测 定各管吸光值。

注意：标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。

SPS 活力单位的计算：

(1)按照蛋白浓度计算

单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SPS 活性 (μg /min/mg prot) = {C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)}÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr

※ 蛋白定量检测建议使用本公司：BCA Protein Assay Kit (C05-02001)

(2)按照样本鲜重计算

单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SPS 活性 (μg /min /g 鲜重) = {C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)}÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W

注： C 标准管：标准管浓度，1000μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入 提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；T：反应时间：10min。