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血磷浓度检测试剂盒(100T)
血磷浓度检测试剂盒(100T)图片
货号: AK331
包装: 100T/96S
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货号: AK331
半岛bd体育手机客户端 别名: Blood Phosphorus Concentration Assay Kit(100T)
半岛bd体育手机客户端 介绍

意义:血磷 (Blood Phosphorus) 主要指血中的无机磷,以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度 关系密切,在以 mg/dL 表示时,二者的乘积([Ca]×[P])为 30~40。当([Ca]×[P])>40,则钙 和磷以骨盐形 式沉积于骨组织;若([Ca]×[P])<35 则妨碍骨的钙化,甚至可使骨盐溶解,影响成骨 作 用。血钙和血磷含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平 衡。上述 平衡受到维生素 D3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。

原理:去除血清中有机磷后,无机磷盐与钼酸铵试剂生成磷钼酸,被硫酸亚铁还原后呈蓝色,在620nm 有光吸收;通过测定 620 nm 吸光度,计算血液中磷含量。

检测方法:微量法

半岛bd体育手机客户端 组成及保存条件:

编号

规格

储存条件

AK331-A

125 ml×1 瓶

4℃保存;

AK331-B

1.6 mL×1 瓶

4℃保存。临用前加 10 mL 蒸馏水溶解;

AK331-C

粉剂×1 瓶

4℃保存。临用前配制,依次加入 11 mL 蒸馏水充分溶解,

再加入 AK331-B,充分混合。

AK331-标准液

1ml×1 瓶

0.02 m mol/L 无机磷,4℃保存;

※ 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

自备用品:

离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸馏水。

测定步骤:

1. 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长到 620 nm,蒸馏水调零。

2. 取出标准液,室温放置 30min。

3. 血清预处理:吸取 50 μL 血清,加 950μL AK331-A,混匀后室温 8000rpm,离心 10min, 取上清液,待测。

4. 取微量石英比色皿/96 孔板,按顺序加入下列试剂

试剂名称

空白管 (μL)

标准管(μL)

测定管 (μL)

蒸馏水

50



标准液


50


上清液



50

AK331-A

50

50

50

AK331-C

100

100

100

混匀后静置 10min,于 620 nm 测定吸光度,记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管。

注意:空白管和标准管只需要测定一次。

血磷浓度计算:

血磷含量 (mmol/dL) = [C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×样品稀释倍数×V 样 总 = 2×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)

注: C 标准液:0.02 mmol/L;样品稀释倍数:(50 μL 血清+950 μL AK331-A)÷50 μL 血清=20;V 样总:100 mL=0.1 L。

注意事项:

1. AK331-C 需临用前配制,如未用完,4℃保存,最多可使用 3 天;

2. 测定过程中,应尽量避免溶血,因为红细胞中有机磷酯进入血清后可被酶水解而使得血 清无机磷含 量增高。

3. 采血后宜尽早进行血清钾测定,时间过长会影响血清钾含量。

4. 最低检出限为 10μ mol/L。

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