意义：无机磷主要指磷酸根，参与生物体内多种代谢，包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱

磷酸化等等，此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。

原理：钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定 660nm 光吸收，即可计算无机磷含 量。

检测方法：微量法

半岛bd体育手机客户端 组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
AK357-A	100ml ×1 瓶	4℃保存；
AK357-B	5ml ×1 瓶	4℃保存；
AK357-C	粉剂 ×1 瓶	4℃避光保存。临用前配制，加入 10 mL 蒸馏水，充分溶 解后加入试 剂二(全部)，混匀。
AK357-D	液体×1 支	标准品：1mmol/L 无机磷标准液，4℃保存。

※ 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

自备用品：

紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、水浴锅、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。

无机磷提取：

按照组织质量(g)：AK357-A 体积(mL)为 1:5～10 的比例(建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL AK357- A)进行冰浴匀浆。10000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。

2. 打开水浴锅，调节温度到40℃。

3. 在 0.5mL EP 管中按列表中顺序加入上述试剂，

试剂名称	空白管 (ul)	标准管 (ul)	测定管 (ul)
上清液			10
标准品		10μL
蒸馏水	100	90	90
AK357-C	100	100	100
混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min 后于660 nm 测定吸光度，
	记为：A 空白管。	记为：A 标准管	记为：A 测定管

注意：空白管和标准管只需测定一次。

组织无机磷含量计算：

1. 按照蛋白含量计算

无机磷含量 (mmol/mg prot) = [C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷Cpr = 1×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr

2. 按照样本质量计算

无机磷含量 (mmol/g ) = [C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W = 1×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W

注： C 标准液：1mmol/L；V 总：上清液总体积，1mL=0.001 L；W：样品质量(g)；

注意事项：

1. 试剂三需临用前配制，并且当天使用完毕。

2. 40min 内完成比色。

3. 最低检出限为 10μ mol/L。