细胞系描述
种属:昆虫
组织来源:幼虫
生长特性:半悬浮或贴壁生长
微生物,支原体检测:阴性
培养条件:
完全培养基:Grace's Insect Medium with L-glutamine and supplemented with:500 mg/l calcium chloride,2800 mg/l potassium chloride,3330 mg/l 水解乳蛋白,3330 mg/l 酵母浸出液,10% 热灭活的胎牛血清。
或者MEM+10% 热灭活的胎牛血清
血清我们推荐用:
GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。
培养条件:28.0℃
传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
1,如果发现有细胞掉到液里,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液到无菌的离心管内离心,吸走上清,加新配制的培养液6-8ml,打匀细胞后吸到新培养瓶内继续培养。
2,老瓶内剩余10ml左右的培养液,用细胞刮刮下细胞或用吸管吹打下细胞后,把悬浮有细胞的培养液吸到离心管中,离心800-1000转/min,10min.,吸走上清后,加新配制的培养液,按每瓶6-8ml加入完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二或三。(以后细胞传代就按此方法)。
注:1、观察细胞**在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。
2、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
3、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。
冻存方法:
冻存液:90%完全培养液,10%DMSO. 现用现配。
储存:液氮储存