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USMC,大鼠血管平滑肌细胞
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细胞系描述

种属:Rattus norvegicus

组织来源:大鼠血管

生长特性:贴壁生长

形态特征:成纤维样细胞

支原体和其它微生物:阴性

培养条件:

完全培养基:90%DMEM(含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清,需补加10ng/ml的bFGF,否则细胞生长状态不好,增殖速度很慢,传代数不高。

血清我们推荐用:

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培养温度:37℃,CO2:5%

传代方法:

收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:

如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。

如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热,然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的**次传代一般是一传二。

注:1、观察细胞**在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

冻存方法:

冻存液:90%完全培养液,10%DMSO。现用现配。

储存:液氮。

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